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特点
- 减轻 PCR 抑制剂（如乙醇、肝素和其他潜在抑制剂）的携带污染
- 有助于与二级结构复杂的核酸模板进行反应
- 改善与镁螯合剂（如 EDTA）携带污染的反应
- 与 QIAGEN 用于 dPCR、终点 PCR 和 qPCR 的试剂盒和仪器兼容
产品详情
Q-Solution Kit 专为优化具有挑战性的 qPCR 和 dPCR 反应条件而设计。试剂盒中包含 5 倍 Q-Solution 和 25 mM MgCl2，可单独使用，也可组合使用。如有必要，您可以滴定两种溶液的浓度范围。
绩效
尽量降低 PCR 抑制剂的影响
Q-Solution 是一种创新的多功能 PCR 添加剂，可与任何 QIAcuity 预混液一起使用。Q-Solution 的特殊特性可减轻残留酒精、肝素、腐植酸等抑制剂或其他可能影响 PCR 反应的关键试剂的携带污染（图 1）。
增强引物结合亲和力
如果您怀疑引物或探针结合力弱导致 PCR 性能不佳，可尝试在 PCR 反应中加入 MgCl2。
与多种 dPCR 和 qPCR 预混液兼容
在任何 dPCR、终点 PCR 或 qPCR 反应中都可能存在困难的 PCR 条件，从而实现通量、可重复性和灵敏度。无论您的应用是什么，数据都表明 Q-Solution Kit 可以增强 dPCR、终点 PCR 和 qPCR 反应，在某些情况下，只需简单滴定两种组分即可。
原理
通过降低 DNA 的熔化温度，Q-Solution 可以克服高 GC 含量或二级结构复杂的 DNA 带来的困难，如腺相关病毒（Adeno-Associated Virus，AAV）基因组中的 DNA。该试剂盒还能提高存在抑制剂时的 PCR 效率。可选择添加 MgCl2，以防止 EDTA 等螯合剂导致的 PCR 失败。作为 DNA 聚合酶的必需辅助因子，MgCl2 可以稳定双链 DNA 结构，包括引物和模板之间形成的结构。有关纳米微孔板中 dPCR 反应的原理说明，请参见此处。
程序
该方案简单，可在任何使用 QIAcuity Digital PCR System 的实验室中进行。根据用户手册中的说明，用户可以照常准备反应混合液，并按照“快速启动方案”中所述加入 Q-Solution 和 MgCl2。用移液器将混合液移入纳米微孔板。我们建议在首次使用前滴定 Q-Solution 和 MgCl2，以找到特定反应设置的最佳浓度。
应用
Q-Solution Kit 非常适合 QIAcuity 上的各种 dPCR 反应以及终点 PCR 和 qPCR 反应。有关更多应用示例，请查看“资源”部分中的应用说明。
辅助数据和图表
Q-Solution 可抵消 QIAcuity dPCR 反应中乙醇携带污染的影响。
当反应中含有 3.5% 或 5% 的乙醇时，用 dPCR Mutation Assay BRAF 476 Human 定量野生型 BRAF 基因座的 QIAacuity Probe PCR Kit 反应会受到抑制，如 1D 散点图中的 U 形和相对于不含乙醇的对照反应的定量所示。
资源
Certificates of Analysis (1)