QIAexpress Type IV Kit
Para la expresión de alto nivel y purificación de un solo paso de proteínas con etiquetas His del extremo N
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Cat. No. / ID: 32149
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Los QIAexpress pQE Vectors aúnan un potente promotor T5 de fago (reconocido mediante ARN polimerasa de E. coli) con un módulo doble de represión de operón lac para proporcionar una expresión estrictamente regulada de alto nivel de proteínas recombinantes en E. coli. La síntesis de proteínas se bloquea de manera eficaz en presencia de niveles altos de represor lac y se mejora la estabilidad de constructos citotóxicos. Los vectores pQE (véanse la figura Vectores pQE y la tabla) posibilitan la colocación de la etiqueta His en el extremo N o C de la proteína recombinante.
Elemento | Descripción |
---|---|
1. Elemento promotor/operador optimizado | Se compone del promotor T5 de fago y dos secuencias de operón lac, que aumentan la probabilidad de unión del represor lac y garantizan la represión eficaz del potente promotor T5 |
2. Sitio sintético de unión al ribosoma RBSII | Para traducción eficaz |
3. Secuencia de codificación de etiqueta His | 5' o 3' a la región de clonación del polilinker |
4. Codones de parada traslacionales | En todos los marcos de lectura para preparar cómodamente los constructos de expresión |
5. Dos terminadores transcripcionales fuertes, | t0 del fago lambda y T1 del operón rrnB de E. coli, para evitar la transcripción de lectura y garantizar la estabilidad de los constructos de expresión |
6. Origen de replicación ColE1 | De pBR322 |
7. Gen beta-lactamasa (bla) | Confiere resistencia a la ampicilina |
Los insertos que codifican proteínas de interés se clonan en constructos apropiados y se transforman en una cepa E. coli adecuada para su expresión. La expresión se induce añadiendo IPTG. Los constructos del QIAexpress Type IV Kit se pueden transformar en E. coli, utilizados como vector lanzadera para la expresión de proteínas recombinantes en células de insectos, o transfectarse en células de mamíferos.
El QIAexpress Expression System proporciona un alto nivel de expresión de proteínas idóneo para muchas aplicaciones, como por ejemplo:
Features | Specifications |
---|---|
Applications | Proteómica |
Yield | <50 % de proteína total |
Special feature | Sistema completo y versátil para purificación en un solo paso |
Tag | Etiqueta 6xHis |
Processing | Manual |
Start material | Lisado celular |
N- or C-terminal tag | Etiqueta N-terminal |