Ni-NTA Superflow Cartridges

• Purificación en un paso más robusta en la gama más amplia de condiciones
• Alto rendimiento de proteína de gran pureza, con un máximo de 50 mg/ml
• Procesamiento rápido, sencillo y reproducible en cualquier sistema LC

Ni-NTA Superflow, la resina más citada utilizada para la purificación de proteínas marcadas por His, está disponible en cartuchos precargados de 1 ml y 5 ml para la purificación automatizada en sistemas de cromatografía líquida, como los sistemas FPLC, ÄkTA y BioLogic, o la purificación manual por medio de jeringa.

Ni-NTA ofrece un desempeño superior al proporcionar altos rendimientos de proteínas de gran pureza, en comparación con otras resinas (consulte la figura  Ni-NTA supera a otras resinas para proporcionar altos rendimientos de proteínas de gran pureza). Una comparación independiente con otras resinas de níquel disponibles en el mercado demostró que NTA Superflow muestra el nivel más bajo de lixiviación del níquel (consulte la figura  Un estudio independiente muestra que Ni-NTA pierde menos níquel que ninguna otra resina probada). La importancia aquí es que si el níquel se lixivia de la resina, los ligandos cargados restantes actúan como un intercambiador de iones y unen proteínas sin marcador que contaminarán fracciones de elución. La mayor estabilidad de Ni-NTA implica que incluso en la presencia de 10 mM de DTT se puede utilizar para obtener proteínas totalmente activas y de gran pureza (consulte la figura  El lugar de coordinación adicional en Ni-NTA une al ion níquel con más fuerza que la IDA).

Como se muestra en la tabla, las purezas son consistentemente altas en todas las escalas de purificación. Los Ni-NTA Superflow Cartridges forman parte de las soluciones integrales y complementarias para la proteína marcada con His que ofrece QIAGEN (consulte la figura  Purificación escalable de cantidades de nanogramos a gramos de proteínas marcadas con His).

Las matrices de Ni-NTA son la solución de elección de la cromatografía de afinidad para purificar las proteínas marcadas con His (consulte la figura  Purificación eficiente en un paso de las proteínas marcadas con His). Su alta estabilidad implica que son compatibles con una amplia gama de componentes de tampones, incluyendo los desnaturalizantes y detergentes potentes e incluso los agentes reductores (consulte la tabla Reactivos compatibles con la interacción His/Ni-NTA). Esta flexibilidad permite a los investigadores desarrollar esquemas óptimos de purificación a la vez que se siguen beneficiando de las excelentes características de separación proporcionadas por Ni-NTA, lo que a menudo hace que un segundo paso cromatográfico sea innecesario.

Las matrices Ni-NTA se pueden utilizar para aumentar la purificación de las proteínas marcadas con His para estudios estructurales (por ejemplo, utilizando la cristalografía de proteína o NMR), o para producir cantidades de gramos para la producción biofarmacéutica.