Cuantificación de miARN

Examine de manera detallada y exacta cualquier tipo de miARN

La PCR cuantitativa es la herramienta predilecta para analizar las dianas conocidas de miARN y ofrece varias ventajas en comparación con la NGS. La qPCR es rápida, sencilla y económica y proporciona análisis extremadamente sensibles a partir de bajas cantidades de ARN de partida. También se adapta fácilmente desde la detección sistemática y la elaboración de perfiles hasta la validación de los estudios de NGS y la verificación de los resultados de los estudios funcionales.

Pero las qPCR de miARN plantean unos retos especiales. Su baja abundancia, las secuencias cortas, la gran variación en contenido de GC y las familias altamente homólogas dificultan el diseño de cebadores y sonda muy específicas. Hemos diseñado los sistemas miRCURY LNA miRNA PCR y Probe PCR para superar estas dificultades, de manera que pueda disponer de un proceso de caracterización de miARN robusto y muy sensible, incluso para sus aplicaciones más exigentes.

qPCR de miARN optimizada con ANB

Cómo puede beneficiarse

Opciones flexibles

Elección de SYBR Green o detección basada en sondas, ensayos individuales o paneles, RT-qPCR de uno o dos pasos.

Detección muy sensible

Cuantifique miARN de hasta 1 sola copia sin necesidad de amplificación previa

Resultados garantizados

Los ensayos prediseñados para todos los miARN y las herramientas que permiten personalizar el diseño en línea de manera sencilla garantizan unos análisis de cualquier miARN con resultados óptimos

Rapidez para obtener el resultado

Flujo de trabajo rápido y sencillo: se obtienen los datos a partir del ARN en solo 2-3 horas y no necesita amplificación previa

Analice cualquier miARN

Detecte y distinga los miARN aunque estén estrechamente relacionados e independientemente de su contenido en AU

Optimizado con ANB

Los diseños optimizados evitan las amplificaciones no específicas y la formación de dímeros de cebador para posibilitar una mayor sensibilidad y especificidad

Analice todos los biomarcadores de miARN con facilidad

Los miARN muestran un alto potencial como biomarcadores de enfermedades y procesos biológicos, como el cáncer, las cardiopatías, la actividad del sistema nervioso, la hemostasia, la reparación del ADN, etc.

Nuestra oferta de ensayos PCR de miARN prediseñados es la más completa del mercado, lo que facilita que pueda encontrar los ensayos que necesite para sus dianas de interés. Cada una de nuestras carteras incluye más de 31 000 ensayos únicos para 271 especies y proporciona una cobertura completa de dianas en miRBase 22.

¿Está estudiando un miARN novedoso o un ARN pequeño? Utilice nuestro práctico asistente en línea para solicitar ensayos personalizados si no hay disponible ningún ensayo prediseñado.

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Study the relevant targets for relevant results

Estudie las dianas pertinentes para obtener resultados relevantes

Nuestros paneles específicos prediseñados cubren diversas especies y proporcionan una manera práctica y rápida de detectar miARN relevantes desde el punto de vista biológico. Las dianas de cada panel fueron seleccionadas cuidadosamente a partir de una combinación de búsquedas bibliográficas, NGS y otros estudios, así como del asesoramiento de destacados expertos.

Los paneles específicos de suero/plasma se desarrollaron con todo el cuidado a partir de nuestros amplios análisis de la expresión de miARN en muestras de sangre, suero y plasma, así como de un número limitado de artículos publicados revisadas por colegas disponibles. Se usó más de 1 millón de puntos de datos internos y de colaboradores de muestras de suero/plasma procedentes de individuos sanos y enfermos para seleccionar miARN relevantes, incluidos datos de expresión de miARN de diferentes fases de cánceres diversos, trastornos neurológicos, enfermedades neurodegenerativas, alergias, inflamaciones, etc.

Todos los paneles se pueden solicitar en línea de manera sencilla a través de GeneGlobe.

Explorar los paneles específicos

Ensayos diseñados óptimamente para cualquier diana de miARN

Las longitudes de secuencia corta y las grandes similitudes complican el diseño de ensayos de miARN. Superamos la dificultad optimizando nuestros ensayos con ácidos nucleicos bloqueados (ANB).

Las bases de ANB aumentan la afinidad de unión del cebador, lo que nos permite diseñar cebadores y sondas muy cortas, que pueden colocarse directamente en la diana de miARN para crear dos puntos de hibridación específicos para miARN que no se sobreponen. Esto no es posible con oligonucleótidos estándar. El resultado es un diseño óptimo del ensayo, que detecta con precisión su miARN de interés con una especificidad que puede distinguir incluso diferencias de un único nucleótido.

Además, los ANB posibilitan normalizar el cebador Tm para que todos los cebadores tengan el Tm óptimo para conseguir una amplificación uniforme. Esto le permite detectar simultáneamente dianas de alta y baja abundancia con contenido heterogéneo de GC.

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Quantify low-abundance miRNAs without preamplification

Cuantifique miARN de abundancia baja sin amplificación previa

La cuantificación de miARN poco abundantes con qPCR requiere, normalmente, una amplificación previa. Sin embargo, gracias a los sistemas miRCURY LNA miRNA PCR, obtendrá resultados precisos sin necesidad de llevar a cabo este paso adicional.

¿Cuál es el secreto? Es la optimización mediante ANB. El incremento de la afinidad de unión de los oligonucleótidos de ANB nos permite diseñar ensayos que pueden detectar cualquier miARN relevante biológicamente con la máxima especificidad y sensibilidad, sin necesidad de preamplificación.

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Flujo de trabajo y productos

Elección de la sustancia química de detección

Le ofrecemos la posibilidad de elegir entre la detección basada en SYBR-Green y la basada en sondas de hidrólisis, teniendo en cuenta que ambas ofrecen una alta sensibilidad y una detección específica.

miRCURY LNA miRNA PCR (SYBR Green)

Detección basada en SYBR Green práctica y económica mediante dos cebadores específicos para miARN y que no se superponen. El análisis de la curva de fusión es posible para estudios de CC, y hay disponible una gama más amplia de paneles prediseñados.

miRCURY LNA miRNA Probe PCR

El único sistema de detección para miARN basado en sondas con sonda y cebador específicos para miARN y que no se solapan. La química de RT-PCR muy fiable admite configuraciones automatizadas manteniendo las reacciones estables durante hasta 100 horas a temperatura ambiente.

¿Cuál es la química de detección adecuada para usted?

Cada método ofrece unas ventajas únicas cuando se trata de costes, facilidad de uso, especificidad, fiabilidad, flexibilidad de diseño o capacidad de multiplexado.

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Flujo de trabajo rápido y sencillo

Los sistemas miRCURY LNA miRNA PCR combinan la comodidad y la velocidad de una reacción de transcripción inversa universal con la sensibilidad y la especificidad de los cebadores de qPCR optimizados con ANB. El sencillo flujo de trabajo proporciona unos resultados rápidos y precisos para todos los tipos de muestras, incluidos tejidos, células, exosomas y biopsias líquidas.

Qué necesita para empezar

Un kit universal de transcripción inversa (1) contiene la química para detección basada en sondas y en SYBR Green. Las mezclas maestras (3) de PCR específicas para cada sistema se combinan con su elección de ensayos o paneles (4) prediseñados o autodiseñados. El kit opcional RNA Spike-In Kit (2) le permite llevar a cabo controles de calidad de aislamiento de ARN, síntesis de ADNc y pasos de amplificación de PCR, de manera que pueda identificar cualquier muestra con calidad deficiente en fases tempranas, eliminarla del estudio y ahorrar tiempo y reactivos.

	Sistema de detección	SYBR Green	Sonda de hidrólisis optimizada con ANB
1	Transcripción inversa	miRCURY LNA RT Kit	miRCURY LNA RT Kit
2	Puntas opcionales	RNA Spike-In Kit, para RT	RNA Spike-In Kit, para RT
3	Mezcla maestra para qPCR	miRCURY LNA SYBR Green PCR Kits	miRCURY LNA Probe PCR Kits
4	Ensayo o panel	• miRCURY LNA miRNA PCR Assays • miRCURY LNA miRNA Custom PCR Assays • miRCURY LNA miRNA Focus PCR Panels • miRCURY LNA miRNA Custom PCR Panels • miRCURY LNA miRNA miRNome PCR Panels	• miRCURY LNA miRNA Probe PCR Assays • miRCURY LNA miRNA Custom Probe PCR Assays Próximamente: • miRCURY LNA miRNA Focus Probe PCR Panels • miRCURY LNA miRNA Custom Probe PCR Panels • miRCURY LNA miRNA miRNome Probe PCR Panels

¿Qué ensayo o panel es mejor para su estudio?

Los sistemas miRCURY LNA miRNA PCR le permite diseñar a medida la configuración experimental de diversos tipos de estudios con ensayos individuales o paneles personalizados completamente flexibles. Puede usar la misma reacción de ADNc y cambiar sin problemas entre cebadores individuales, miRNome prediseñados y paneles Focus o paneles personalizados.