QIAamp DSP DNA Blood Mini Kit

• Système universel de purification de l’ADN compatible avec d’autres produits IVD
• Prélèvement flexible des échantillons (1)
• Compatible avec différents anticoagulants et tubes
• Choix entre protocole de centrifugation et protocole sous vide (1)

Le kit QIAamp DSP DNA Blood Mini permet de purifier les ADN par membrane de silice. Le kit QIAamp DSP DNA Blood Mini est conçu pour les laboratoires traitant le sang dans le cadre du diagnostic in vitro.

L’ADN génomique purifié à l’aide du kit QIAamp DSP DNA Blood Mini est prêt à être utilisé dans des applications en aval telles que celles reposant sur l’amplification enzymatique ou d’autres modifications telles que la PCR.

Les échantillons de sang total peuvent être prélevés à l’aide de plusieurs types de tubes contenant de l’anticoagulant (EDTA ou citrate), y compris les tubes BD Vacutainer, Monovette et Vacuette (voir tableau). Les échantillons de sang peuvent être congelés et décongelés au moins 3 fois et rester une source fiable pour la purification de l’ADN (voir figure « ADN provenant de sang congelé et décongelé »).

Le kit QIAamp DSP DNA Blood Mini utilise la technologie QIAamp pour la purification de l’ADN génomique. La membrane de silice de QIAamp lie spécifiquement l’ADN dans l’échantillon lysé, tandis que le reste du lysat est rapidement retiré par centrifugation ou aspiration sous vide. L’ADN lié est lavé de manière efficace afin d’éliminer les contaminants puis élué dans un volume de 50 à 200 µl.

L’ADN génomique est purifié à partir du sang grâce à l’une des deux procédures alternatives, à savoir une centrifugation ou une chambre à vide et une centrifugation (voir schéma « Procédure »). Le système universel de purification d’ADN permet la compatibilité avec d’autres produits de diagnostic in vitro (voir « Déroulement des opérations »).

L’échantillon de sang contenant l’EDTA ou le citrate (200 µl) est lysé en présence de la protéase QIAGEN et du tampon de lyse à 56 °C pendant 10 minutes. L’éthanol est ensuite ajouté au lysat pour optimiser la liaison de l’ADN à la membrane QIAamp. Le lysat est appliqué sur une colonne de centrifugation QIAamp Mini puis il est passé à la centrifugeuse ou soumis à une pression sous vide. L’ADN se lie à la membrane QIAamp dans la colonne de centrifugation et le reste du lysat passe à travers. L’ADN lié est lavé de manière efficace par deux tampons de lavage différents qui traversent aussi la membrane QIAamp par centrifugation ou pression sous vide. La membrane QIAamp est ensuite séchée par centrifugation. Le tampon d’élution (50 à 200 µl) est appliqué à la membrane QIAamp et, après une minute d’incubation, la colonne de centrifugation est centrifugée pour éluer l’ADN pur.

La purification de l’ADN à l’aide du kit QIAamp DSP DNA Blood Mini peut être entièrement automatisée sur le QIAcube. En cas d’automatisation du kit QIAamp DSP DNA Blood Mini sur l’instrument QIAcube, l’instrument peut traiter moins de 50 échantillons en raison des volumes morts, de l’évaporation et de la consommation supplémentaire de réactif par pipetage automatisé. QIAGEN ne garantit que 50 préparations d’échantillons en cas d’utilisation manuelle du kit QIAamp DSP DNA Blood Mini.

Le kit QIAamp DSP DNA Blood Mini utilise la technologie QIAamp pour une purification de l’ADN à partir de sang total frais ou congelé et de sang traité au citrate ou à l’EDTA.