therascreen IDH1/2 RGQ PCR Kit CE

• Conforme à la directive européenne IVD 98/79/CE
• Détection précise de 7 mutations de gène IDH1 et de 5 mutations du gène IDH2 grâce au clampage par PCR (1)
• Identification sensible de 3 mutations à l’aide de la technologie PCR ARMS (1)
• Analyse standardisée avec solutions prêtes à l’emploi
• Procédure simple grâce à l’instrument Rotor-Gene Q

Le kit therascreen IDH1/2 RGQ PCR fournit les réactifs nécessaires à la réalisation de 9 réactions distinctes d’amplification pour la détection de 12 mutations (1) :

• 3 réactions d’amplification totale dans les codons 132 et 100 du gène IDH1 et dans le codon 172 du gène IDH2
• 3 réactions d’amplification de mutation dans les codons 132 et 100 du gène IDH1 et dans le codon 172 du gène IDH2
• 3 réactions d’amplification spécifique aux mutations R132H et R132C d’IDH1 et R172K d’IDH2

Mélanges réactionnels totaux

Les mélanges sonde et amorces totaux (PPM-Total) utilisent des sondes et des amorces pour amplifier à la fois les séquences cibles mutées et de type sauvage. (1)

Mélanges réactionnels de détection des mutations

Les mélanges sonde et amorces de détection des mutations combinent sondes et amorces pour amplifier à la fois les séquences cibles mutées et de type sauvage, plus un oligonucléotide bloqué à l’extrémité 3' avec l’ajout d’un groupe de phosphates pour inhiber l’extension (clampage par PCR), spécifique à la séquence cible de type sauvage. (1)

Lorsque la matrice destinée à la PCR contient la séquence de type sauvage, l’oligonucléotide 3'-phosphate domine la liaison avec les amorces de PCR en raison d’une plus grande affinité. L’extension et l’amplification dans le cas de l’ADN polymérase sont faibles voire inexistantes. (1)

En présence d’une séquence mutée, la liaison d’amorce domine la liaison d’oligonucléotide 3'-phosphate et l’amplification se poursuit. (1)

Mélanges réactionnels d’identification des mutations

L’amplification spécifique d’allèle s’effectue par le biais du système ARMS (système de mutation réfractaire par amplification), qui exploite la capacité de l’ADN polymérase à établir une distinction entre un appariement et un mésappariement à l’extrémité 3' d’une amorce de PCR. (1)

Lorsque l’amorce de PCR est entièrement appariée, l’efficacité de l’amplification est maximale. Lorsque la base 3' est mésappariée, seule une amplification de faible bruit de fond se produit. (1)