Enzymes for molecular biology
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Cet outil permet de déterminer la masse d’insert nécessaire pour divers inserts : rapports molaires du vecteur dans la plage adaptée aux réactions avec ligature types.
Masse d’ADN insert requise [g] = masse d’ADN vecteur [g] × {longueur d’ADN insert / longueur d’ADN vecteur} × rapport molaire insert-vecteur souhaité
Remarques : Le rapport souhaité est l’un des rapports définis {1, 2, 3, 5 ,7}
La longueur d’insert doit être inférieure à la longueur de vecteur
En premier lieu, l’ADN insert et vecteur est digéré par endonucléases de restriction afin de créer des fragments d’ADN à extrémités cohésives (ou franches). Ensuite, les fragments d’ADN souhaités sont isolés et liés puis traités par ADN ligase. Enfin, le vecteur intact obtenu est transformé en cellules d’E. coli puis les transformées sont identifiées par des méthodes de sélection génétique adaptées.
Vous voulez en savoir plus sur le processus étape par étape de ligature d’ADN et sa réaction type ? En savoir plus.
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