Qproteome Mitochondria Isolation Kit

Pour l’isolement efficace de préparations mitochondriales d’une grande pureté

✓ Traitement automatique des commandes en ligne 24 h/24 7 j/7

✓ Assistance technique et produits pertinente et professionnelle

✓ Commande (ou réapprovisionnement) rapide et fiable

Qproteome Mitochondria Isolation Kit

Cat. No. / ID: 37612

Tampons et réactifs pour 12 préparations mitochondriales haute pureté

Le Qproteome Mitochondria Isolation Kit est destiné aux applications de biologie moléculaire. Ce produit n’est pas conçu pour le diagnostic, la prévention ou le traitement des maladies.

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Caractéristiques

Mitochondries intactes d’une grande pureté
Grande reproductibilité avec une procédure standardisée
Format de kit pratique, rapide et facile à utiliser

Détails produit

Le Qproteome Mitochondria Isolation Kit permet d’effectuer des préparations mitochondriales parfaitement actives d’une très grande pureté, dans une procédure standardisée rapide et reproductible, à l’aide d’une centrifugeuse de paillasse standard.

Performances

Contrairement à une méthode de centrifugation différentielle issue de la littérature, l’analyse des protéines de marqueur d’un compartiment cellulaire indique que le Qproteome Mitochondria Isolation Kit donne des fractions mitochondriales quasiment sans contamination croisée (voir l’illustration Fractions mitochondriales quasiment sans contamination croisée). La quasi-absence de contaminants cytosoliques facilite nettement l’analyse d’espèces peu abondantes comme le révèlent les analyses de 2D-PAGE, et cette procédure douce donne une fraction hautement enrichie qui contient des mitochondries intactes (voir l’illustration ). Pour démontrer l’intégrité, vous pouvez aussi mesurer le colorant fluorescent ajouté (voir l’illustration Davantage de mitochondries intactes par milligramme de protéine).

Voir les illustrations

Mitochondries d’une grande pureté avec membranes mitochondriales intactes.

Principe

L’un des principaux problèmes des chercheurs travaillant sur les mitochondries est la séparation performante des fractions mitochondriales et cytosoliques. Les méthodes de préparation classiques sont fastidieuses, chronophages et nécessitent l’utilisation d’une ultracentrifugeuse. Le Qproteome Mitochondria Isolation Kit permet d’effectuer des préparations mitochondriales parfaitement actives d’une très grande pureté, dans une procédure standardisée rapide et reproductible, à l’aide d’une centrifugeuse de paillasse standard.

Applications

Les mitochondries font l’objet d’études approfondies dans un certain nombre de domaines, notamment l’apoptose, la protéomique, la recherche biomédicale et la découverte de nouveaux médicaments. Le Qproteome Mitochondria Isolation Kit donne des mitochondries d’une grande pureté dont les protéines conservent leur conformation native et leur pleine activité biologique, ainsi sont-elles tout à fait adaptées aux études sur l’apoptose, à l’analyse de 2D-PAGE et à d’autres dosages biochimiques.

Données et illustrations utiles

Davantage de mitochondries intactes par milligramme de protéine.

Les mitochondries ont été isolées avec le Qproteome Mitochondria Isolation Kit ou un autre kit du commerce (fournisseur S) conformément aux consignes du fabricant. L’intégrité de la membrane mitochondriale est indiquée par la formation d’agrégats fluorescents après l’ajout d’un colorant de carbocyanine.

Fractions mitochondriales quasiment sans contamination croisée.

Specifications

Features	Specifications
ApplicationsFR	SDS-PAGE, spectrométrie de masse, dosages d’activité
Sample size	5 × 10e6 à 2 × 10e7 cellules, 20 mg à 60 mg
For glycoproteins: which type of glycoproteins	n.d
Binding capacity/yield	20 à 80 µg
Species	Eucaryotes
Fractions isolated	Une fraction
Start material	Cellules, tissus

Ressources

Download Safety Data Sheets for QIAGEN product components.

For purification of mitochondria from eukaryotic cells and tissues

FAQ

Even though we have not tested this, we assume that both the QIAamp DNA Micro Kit and the AllPrep DNA/RNA Mini Kit will work to isolate DNA from mitochondria separated with the Qproteome Mitochondria Isolation Kit.

FAQ ID -1188

The Qproteome Cell Compartment Kit, the Qproteome Nuclear Protein Kit, the Qproteome Mitochondria Isolation Kit, and the PhosphoProtein Purification Kit are compatible with tissue samples. The respective protocol can be found in the respective handbook.

The Qproteome Mammalian Protein Prep Kit is also compatible with tissue, there is the QIAGEN Supplementary Protocol: Purification of protein from animal tissues using the Qproteome Mammalian Protein Prep Kit and the TissueRuptor™ available. For all these protocols the TissueRuptor is used.

FAQ ID -755

We have not tested this application. We would suggest to split the sample, and perform different fractionation procedures separately on the two sample portions.

If splitting the sample is not feasible, then it should theoretically be possible to use the pellet generated at step 7 of the QProteome Mitochondria Isolation Kit protocol (containing cell debris, nuclei and unbroken cells) as starting material for the Qproteome Nuclear Protein Kit.

Please note that this application will have to be tested and optimized by the enduser.

FAQ ID -1185

Highly pure and intact mitochondria can be collected after the density gradient centrifugation at step 11b of the Qproteome Mitochondria Isolation protocol.

The fraction collected at step 9 of the protocol, prior to the cushion centrifugation, contains intact as well as broken mitochondria, and may also comprise structures of the ER, Golgi and plasma membranes.

FAQ ID -1187

The Qproteome Mitochondria Isolation Kit can be used with 5 x 10⁶ to 2 x 10⁷ cells. Depending on the cell line, the yield from a single fractionation procedure is 20–80 µg protein from 5 x 10⁶ cells.

Protein can be isolated from the mitochondria using, e.g. the QProteome Mammalian Protein Prep Kit, or home-made lysis buffers.

FAQ ID -1189

Yes, you can use the Qproteome Mammalian Protein Prep Kit to isolate proteins from mitochondria separated with the Qproteome Mitochondria Isolation Kit.

FAQ ID -1190

No, an ultracentrifuge is not required for the Qproteome Mitochondria Isolation Kit. All centrifugation steps are performed in a standard table-top centrifuge.

FAQ ID -1186

The Qproteome Mitochondria Isolation Kit has been developed for cultured mammalian cells. We have tested HeLa, Cos7, NIH, HEK 293 and SH-SY5Y cell lines.

We have not tested animal tissue, yeast, or plant cells. Animal tissue might work if a method for cell disruption that leaves the mitochondria intact can be found. Unfortunately, we do not have any protocol recommendations for these starting materials.

FAQ ID -1184