HiSpeed Plasmid Kits

HiSpeed Plasmid Kitsは遠心分離を必要とせず、陰イオン交換法を用いた迅速でラージスケールのプラスミドDNA調製を実現します。精製されたDNAは、CsCl密度勾配遠心法を2回行なって得られる精製グレードに匹敵し、トランスフェクショングレードのアプリケーションに適しています。

HiSpeed Plasmid Kitsは、吸入マニホールドを使用しない高速の大量プラスミド調製用にQIAfilter Cartridges、HiSpeed TipsおよびQIAprecipitatorモジュールを備えています。シリンジフォーマットのQIAfilterとQIAprecipitatorモジュールにより、従来の陰イオン交換調製法における遠心操作の必要がなくなり、プラスミド精製がより迅速で簡単になりました。150～250 ml の培養液から最高750 µg（Maxi）、または50～150 ml の培養液から最高200 µg（Midi）の高コピープラスミドDNAを精製することができます（培養液の容量はプラスミドのコピー数、添加サイズ、宿主株、培養媒体に依存）。HiSpeed Tipでは、流速が早くなり、プラスミド精製のためのDNA結合、洗浄および溶出ステップをより迅速に行なえます。

HiSpeed Tipsの独自の陰イオン交換樹脂は核酸の精製専用に開発されています。本製品の優れた核酸分離能力により、CsCl密度勾配遠心分離法を2回行なって得たDNAの純度に匹敵、あるいはそれ以上の純度のDNAが精製されます。

QIAfilter Cartridges（図「 QIAfilter Cartridge」を参照）は、バクテリア細胞のアルカリ溶解に続く遠心分離ステップを代替するために設計された特別なフィルターユニットです。遠心分離で要する時間に比べわずかな時間で、SDS沈殿物を完全に除去し、バクテリア溶解物の不純物を除去します。充填済みのHiSpeed Tipsは、自然落下で作動し乾燥することがなく、プラスミド調製に要する直接の作業時間を短縮できます。

独自のQIAprecipitatorモジュール（図「 QIAprecipitatorモジュール」を参照）により、イソプロパノールで沈殿させたDNAを収集するために従来の遠心操作の必要がなくなりました。沈殿したDNAは、QIAprecipitatorモジュールで捕獲され、イソプロパノールやバッファーは流出します。このDNAはTEバッファーあるいは水により、QIAprecipitatorからマイクロ遠心チューブに簡単に溶出されます。また、この独自のモジュールにより、遠心操作後に上清を除去する際に起こり得るペレットを失うリスクもなくなりました。

中和したバクテリア溶解物をQIAfilter Cartridgeでインキュベートし、濾過によりすぐに不純物を除去します。濾過物をHiSpeed tipにアプライしてプラスミドDNAを精製します（フローチャート「QIAGEN Plasmid Kit操作手順」を参照）。溶出したDNAをイソプロパノールで混和し、付属のシリンジでQIAprecipitatorモジュールにアプライします。次に、濃縮され脱塩したDNAは、QIAprecipitatorから直接、TEバッファーまたは水の入ったマイクロ遠心チューブに溶出します。

HiSpeed Plasmid Kitsを用いて精製したDNAは、クローニングやシークエンシングから、トランスフェクション、プラスミド媒介の遺伝子サイレンシングに至るまで、あらゆるアプリケーションで卓越した結果をもたらします。