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Cat. No. / ID: 339371
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miRCURY Probe PCR Kitは、miRCURY LNA miRNA プローブPCR アッセイおよびパネルを使用したプローブベースのmiRNAの定量のために設計された高性能なPCRマスターミックスが含まれます。逆転写反応は、miRCURY LNA RT Kitで行います。miRCURY Probe PCR Kitは、いずれのリアルタイムPCR装置でも使用できるように最適化がなされています。
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miRCURY LNA miRNAプローブPCRシステムは、プライマーおよびプローブの設計自由度を拡充させてアッセイの特異性と感度の向上を可能にするLNAテクノロジー を採用した画期的なmiRNA定量システムです。また、LNAを組み込んだプライマーとプローブは、Tmが高くできるだけでなく、反応の厳密さを高め、AUの含有量に関係なく、単一のヌクレオチドが異なるmiRNAを区別することも可能になります。フォワードプライマーとプローブはmiRNA特異的で、他の検出システムよりも短くなっています( miRCURY LNA miRNA プローブPCR システムを一言でいえば 参照)。このように、アッセイは、特異性と感度を向上させるようなLNAの設計がなされています。実際、このシステムでは、前増幅なしでターゲットmiRNAを1コピーまで定量することができます。さらに、ワークフローは迅速かつ簡便で、RNAからデータ取得までを2時間で完了します。優れたアッセイの柔軟性により、室温でのセットアップを実現したおかげで、あとでPCR実行時間の自由度が上がり、自動化にも柔軟に対応できます ( 反応の安定性とセットアップの柔軟性 参照)。QuantiNova酵素は、技術的および生物学的複製の間で再現性の高い結果を提供します ( QuantiNovaのホットスタートメカニズム 参照)。
わかりやすい2時間プロトコールにより、時間と労力を節約できます。 ユニバーサルトランスクリプションと最適化されたRT-PCRプロトコールを使用することにより、他のソリューションと比較して手順が大幅に簡素化されます。さらに、RTステップで生成されたcDNAは、miRCURY LNA miRNAプローブPCRシステムに共通で使用できるため、研究ニーズに応じてパネルからアッセイにシームレスに移行でき、サンプルと時間を節約できます。さらにピペッティングのステップ数が最小限に抑えられ、技術的なばらつきも最小限に抑えられます。このシンプルなワークフローとISO準拠のアッセイを組み合わせることで( 高いロット間差 参照)、非常に高い日々およびサイト間での再現性を実現します。
miRCURY LNA miRNAプローブPCRシステムは、リアルタイムPCRによる高感度で特異的なmiRNAの定量化とプロファイリングを可能にします。 検出は、クエンチャー標識された加水分解プローブを使用します。 このシステムは、miRNAからcDNAへの逆転写と、それに続くmiRNAのqPCR検出に関連するすべてのステップをカバーしています。 miRCURY LNA miRNAプローブPCRアッセイおよびパネルは、QuantiNovaプローブマスターミックスを使用して検証されています。 qPCRに他の試薬を使用すると結果に影響する可能性があります。
本製品は、miRCURY LNA miRNAプローブPCR実験におけるRNA分離、cDNA合成、およびPCR増幅ステップでの品質管理が可能で、操作の初期に品質の低いサンプルを特定できるため時間と試薬を節約できます。 キットには、UniSp2、UniSp4、およびUniSp5 RNAスパイクインテンプレートミックスとcel-miR-39-3p RNAスパイクインテンプレートが含まれています。
本製品は、SYBR®を使用するmiRCURY LNA miRNA PCRシステムと、プローブベースのmiRCURY LNA miRNAプローブPCRシステムの両方に共通して使える逆転写反応キットです。 このキットには、2つのシステム固有の反応バッファーと、迅速かつ便利なmiRNAポリアデニル化と逆転写反応を単一の反応ステップで実行するために必要なすべての試薬が含まれています。
本製品には、高性能QuantiNovaプローブマスターミックスとmiRCURYプローブPCRユニバーサルリバースプライマーが含まれています。miRCURY LNA miRNAプローブPCRアッセイまたはmiRCURY LNA miRNAプローブPCRパネルと組み合わせて、定量的リアルタイムPCRによるmiRNA検出を可能にします。
本製品は、miRBaseからの最新のシークエンス情報を使用して成熟miRNAを検出するように設計されたmiRNA特異的な加水分解プローブおよびmiRNA特異的なフォワードプライマーを使用します。 miRCURYプローブユニバーサルリバースプライマーは、miRCURY Probe PCR Kitに含まれています。
本製品は、設計済みのPCRパネルプレートで、miRNome、特定の遺伝子パスウェイ、血清/血漿などの特定のサンプルタイプ、またはユーザーが設計したカスタムパネルに焦点を当てた成熟miRNAを迅速にプロファイリングすることができます。
この無料のWebベースの解析ツールは、直感的な高い操作性を有しています。データの標準化と解析は、簡単なウィザードにより段階的に操作を案内し、論文にも使える図を作成します。
最初のステップである逆転写反応は、作業が簡単な単一チューブ反応です。 miRNAを含むトータルRNAから、逆転写反応で得られたcDNAをLNAを組み込んだプローブとプライマーを使用してリアルタイムPCRで増幅し、成熟miRNAを検出します。 これにより、リアルタイムPCR を利用できるラボならmiRNAの定量化とプロファイリングが簡単に実施できます。
miRCURY プローブPCR キットはmiRCURY LNA miRNA プローブPCR システムの一部として利用されます:
QuantiNova DNA Polymeraseは、QuantiNova抗体とQuantiNovaガードユニットにより、加熱ステップが始まるまで酵素活性を不活化状態で維持します。