miScript miRNA PCR Arrays
miScript PCR Systemを用いたSYBR® GreenベースのリアルタイムPCRによるmiRNAのプロファイリング
miScript miRNA PCR Arrays
miScript PCR Systemを用いたSYBR® GreenベースのリアルタイムPCRによるmiRNAのプロファイリング
パスウエイにフォーカスしたmiScript miRNA PCR Array製品は逐次追加されており、生物学的プロセスにおけるmiRNAの役割についての新しい発見をサポートします。miScript miRNA PCR Arrayのコンテントは、アレイが最新で生物学的に適切であることを保証する当社独自の方法論を用いて選択されています。現在miRNA研究で現在最も関心の高い分野の一つとして、血清や血漿サンプルに存在するmiRNAの評価があります。最近、血清および血漿中で比較的安定した細胞外miRNAが発見されたことで、様々な疾患の非侵襲的バイオマーカーとして、これらmiRNAレベルの変化が注目されています。その結果、Serum & Plasma miScript miRNA PCR Arrayが開発されました。このアレイを用いて、血清と血漿に存在する84種類の最も関連性のあるmiRNAを迅速にプロファイリングできます(図“ 血清または血漿中の循環miRNAの発現解析”)。
パスウエイに焦点を当てたアレイに加えて、最新のmiRNome miScript miRNA PCR Arrayもヒト、マウス、ラット、イヌを含む様々な種で入手可能です。1 µg未満のRNAで、ヒト全miRNomeを迅速にプロファイリングできます(図 “ 全miRNomeプロファイリング”)。miScript miRNA PCR Array中の各アッセイは、リアルタイムPCRによりmature miRNAを高い感度と特異性で検出することが実験的に検証されています。
miScript PCR System は、SYBR GreenベースのリアルタイムPCRを用いて、高い感度と特異性でmiRNAの定量とプロファイリングを容易に実現します。miScript PCR Systemは、RNAをcDNAに変換するステップと 、続くリアルタイムPCRによりmiRNAを検出するステップをすべてカバーします。
miScript PCR Systemを用いたmature miRNAのプロファイリングには次のような製品が必要です:
miScript miRNA PCR Arrayは96ウェル、384ウェル、Rotor-Disc 100フォーマットで入手可能です(図“ Pathway-Focused or miRNome miScript miRNA PCR Array レイアウト:プレートフォーマットA, C, D, F”、“ Pathway-Focused miScript miRNA PCR Array レイアウト:プレートフォーマットE, G”、“ miRNome miScript miRNA PCR Array and miScript miRNA HC PCR Array レイアウト:プレートフォーマットE, G”、および“ miScript miRNA PCR Array レイアウト: Rotor-Disc format R”)。各アレイには数種類のコントロールアッセイが入っています。これらのアッセイの目的は、以下の表に記載されています。
コントロール | 目的 |
---|---|
C. elegans miR-39 miScript Primer Assay | 外在性のSyn-cel-miR-39 miScript miRNA Mimic を用いたデータ標準化 |
6 snoRNA/snRNA miScript Primer Assays (miScript PCR Controls) | 相対定量ΔΔCT 法を用いたデータの標準化 |
miRNA reverse transcription control (miRTC) miScript Primer Assay | 逆転写反応のパフォーマンスを評価 |
Positive PCR control (PPC) | PCRパフォーマンスの評価 |
これらのコントロールに関する詳細はmiScript miRNA PCR Array Handbookをご覧ください。
miScript miRNA QC PCR ArrayとリアルタイムPCRを用いて、複数のcDNAサンプルの品質評価が行なえます。miScript miRNA QC PCR Arrayは96ウェル、384ウェル、Rotor-Disc 100フォーマットで入手可能です(図“ miScript miRNA QC PCR Arrayレイアウト:プレートフォーマット A, C, D, F”、 miScript miRNA QC PCR Arrayレイアウト:プレートフォーマットE, G”、および“ miScript miRNA QC PCR Arrayレイアウト:プレートフォーマットRotor-Disc format R”)。各miScript miRNA QC PCR ArrayにはC. elegans miR-39 miScript Primer Assay、3 mature miRNA miScript Primer Assays(miR-16, miR-21, miR-191)、3 snoRNA miScript Primer Assays(SNORD61, SNORD95, SNORD96A)、miRTC miScript Primer Assay、およびポジティブPCRコントロールのreplicates が入っています。詳細はmiScript miRNA PCR Array Handbookを参照してください。96ウェルプレートおよびRotor-Disc 100フォーマットでは最高8種類のcDNAサンプルの品質管理が可能です。384ウェルフォーマットでは最高32種類のcDNAサンプルの品質管理が可能です。
miScript miRNA PCR Arrays用の使いやすい無料データ解析ソフトがオンラインで利用できます。各miScript miRNA PCR Arrayに専用のデータ解析ツールが付属しています。生のCT 値を入力すると、分析ツールが自動的にPCRアレイコントロールを分析し、∆∆CT 法を用いて相対定量を行ない、さまざまなフォーマットで結果を表示し、迅速にデータ解析が行なえます
miScript PCR Systemを構成するmiScript miRNA PCR Arrayは以下のようなアプリケーションに最適です: