内部マーカーまたは末端標識を付加
酵素でDNAを標識する方法には、分子の末端を標識する方法と、分子に沿って内部を標識する方法の2つがあります。蛍光色素や修飾ヌクレオチドなどの検出可能なマーカーは、酵素作用による5’基および3’基の付加、内部マーカーとともに導入するの場合は適切な酵素の直接取り込みもしくはポストラベリング法により導入
することができます。
酵素を使用した核酸に標識を付加するための方法
酵素の作用によるラベリングは、in vitroや細胞内の核酸の機能や動態の解明を目的とする多くの研究に必要です。DNAやRNAに標識ヌクレオチドを付加できる部位にはすべて、その付加を触媒する適切な酵素があります。
| 製品名 | DNA Polymerase I | Klenow Fragment | Klenow (3'-5'exo-) Fragment |
Mako DNA Polymerase |
T4 DNA Polymerase |
T7 DNA Polymerase |
|---|---|---|---|---|---|---|
| 説明 | 中温性DNA ポリメラーゼ |
E. coli DNA polymerase Iの 断片 |
E. coli DNA polymerase Iの 誘導体 |
エキソヌクレアーゼ 欠損 ポリメラーゼ |
DNAテンプレートに 結合したプライマーを 5'→3’方向に 伸長 |
高プロセス性 DNAポリメラーゼ |
| 特性 | • 5'➞3' DNA 合成 |
• 5'➞3' ポリメラーゼ |
• 5'➞3' ポリメラーゼ |
• 鎖置換 活性は ない |
• 5’末端および 3’末端のポリッシング • 鎖置換 活性はない |
• 極めて高い フィデリティによる 合成および 複製 |
| アプリケーション | ニックトランスレーションによる DNA標識、 cDNA合成 |
5’オーバーハングのフィルインによる DNA末端平滑化、 第2鎖 cDNA合成、 シークエンシング、および 部位特異的 突然変異誘発 |
次世代 シークエンシング用の テーリング、鎖 置換 増幅、 DNA標識 |
シークエンシング | 2本鎖 DNA標識 |
高プロセス性、 部位特異的 突然変異誘発、 第2鎖 cDNA合成 |
| エキソヌクレアーゼ 活性 |
3'➞5'および 5'➞3'両方向の エキソヌクレアーゼ 活性を有する |
3'➞5' エキソヌクレアーゼ 活性を有する、5'➞3' エキソヌクレアーゼ 活性はない |
プルーフリーディング活性 （3'➞5'） を欠失、 ニックトランスレーション （5'➞3'）におけるヌクレアーゼ 活性 |
3'➞5'または 5'➞3' エキソヌクレアーゼ 活性はない |
強力な3'➞5' エキソヌクレアーゼ 活性を有する、5'➞3' エキソヌクレアーゼ 活性はない |
3'➞5' エキソヌクレアーゼ 活性を有する |
| 凍結乾燥対応、 グリセロールフリー |
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