MinElute 96 UF PCR Purification Kit

限外ろ過法を用いた最高 15 μgまでのPCR産物(>100 bp)ハイスループット精製

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MinElute 96 UF PCR Purification Kit (4)

Cat. No. / ID:   28051

4 MinElute 96 UF PCR Purification Plates
Pieces
4
24
MinElute 96 UF PCR Purification Kitは分子生物学的アプリケーション用であり、疾病の診断、予防、あるいは治療に使用することはできません。

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特徴

  • 最小限の溶出量
  • 迅速なプロトコールと簡単な操作
  • 高い再現性と回収率

製品詳細

MinElute 96 UF PCR Purification Kitは限外ろ過法を利用して100 bpを超えるPCR産物のハイスループット精製を96ウェルプレートで実現します。プレートは微量(わずか20 µl)で溶出できるようにデザインされているので、高濃度のDNAが高収量で得られます。本キットはBioRobot Universal System上で完全自動化が可能です。MinEluteシステムで精製したDNA断片はシークエンシング、マイクロアレイ解析、ライゲーション、トランスフォーメーション、制限酵素分解、標識反応、マイクロインジェクション、PCR、in vitro転写を含む多くのアプリケーションに即使用可能です。MinElute 96 UF PCR Purification Kitによる精製には、QIAvac Multiwell吸引マニホールド(cat. no. 9014579)の使用が必要です。

パフォーマンス

MinElute 96 UF PCR Purification Kitは96ウェルプレートにおいてハイスループットPCR精製を実現します。BioRobot 3000(販売終了)、BioRobot 8000(販売終了)、BioRobot Universal Systemで1~8 x 96サンプルの自動化精製、またはQIAvac Multiwell Manifold(cat. no. 9014579、適切な吸引マニホールドが必要。例、QIAvac Multiwellマニホールド、プレートシェーカーが推奨)で1 x 96サンプルを処理できます。本製法により>100 bpのDNAを精製可能であり、回収率は80~95%です。精製されたPCR産物は少ない容量で(マニュアル製法では20 µl 、BioRobotワークステーションでは30 µl)メンブレンの表面から直接溶出され、得られた高濃度の溶出液(図" 高濃度のDNA溶出液")は、様々なダウンストリームアプリケーションにおいて即使用可能です。完全自動化製法でもマニュアル製法でも150 µlまでの容量のPCRサンプルを溶出することができます。
図参照

原理

MinElute 96 UF PCR Purification Kitはマルチウェルテクノロジーの簡便さと、ユニークなデザインの限外ろ過法メンブレンの分離特性を持った製品です。同梱のプレートによって、100 bp 以上の二本鎖DNAを迅速かつ効果的に回収し、またプライマー(<20mers)や取り込まれなかったヌクレオチド、塩類を除去します。

操作手順

MinElute 96 UF PCR Purification Kitsは、QIAvacマニホールド上での吸引による精製を用いた限外ろ過法テクノロジーを使用しています(フローチャート" MinElute 96 UF PCR Purification製法")。PCR 産物を限外ろ過プレートにアプライし、吸引します。プライマーや塩類、取り込まれなかったヌクレオチドのような小さな分子はメンブレンを通過しますが、100 bp 以上のPCR 産物は残ります。水、DMSO、あるいはSSCのようなバッファーを溶出液として使用します。MinElute 96 UF PCR Purification製法は、BioRobot 3000(販売終了)、BioRobot 8000(販売終了)、BioRobot Universal System上で自動化もできます。
図参照

アプリケーション

MinElute 96 UFシステムで精製したDNAフラグメントは以下のようなアプリケーションに即使用可能です。

  • シークエンシング
  • マイクロアレイ解析
  • ライゲーション、トランスフォーメーション
  • 制限酵素分解
  • 標識反応

裏付けデータと数値

Specifications

FeaturesSpecifications
Binding capacity<150 µl
Recovery: oligonucleotides dsDNARecovery: oligonucleotides, dsDNA
Elution volume20–30µl
Format96-well plate
Fragment size>100 bp
Removal <10mers 17–40mers dye terminator proteinsRemoval <20mers
TechnologyUltrafiltration
Sample type: applicationsDNA, oligonucleotides: PCR reactions
ProcessingManual/automated

リソース

キットハンドブック (1)
For efficient, high-throughput purification of PCR products
クイックスタートプロトコール (1)
Certificates of Analysis (1)

Publications

Genome-wide analysis of DNA copy number changes and LOH in CLL using high-density SNP arrays.
Pfeifer D; Pantic M; Skatulla I; Rawluk J; Kreutz C; Martens UM; Fisch P; Timmer J; Veelken H;
Blood; 2006; 109 (3):1202-10 2006 Oct 19 PMID:17053054
Genomic and functional profiling of duplicated chromosome 15 cell lines reveal regulatory alterations in UBE3A-associated ubiquitin-proteasome pathway processes.
Baron CA; Tepper CG; Liu SY; Davis RR; Wang NJ; Schanen NC; Gregg JP;
Hum Mol Genet; 2006; 15 (6):853-69 2006 Jan 30 PMID:16446308
Multilocus sequence typing of Staphylococcus aureus isolated from high-somatic-cell-count cows and the environment of an organic dairy farm in the United Kingdom.
Smith EM; Green LE; Medley GF; Bird HE; Dowson CG;
J Clin Microbiol; 2005; 43 (9):4731-6 2005 Sep PMID:16145134
Multilocus sequence typing of intercontinental bovine Staphylococcus aureus isolates.
Smith EM; Green LE; Medley GF; Bird HE; Fox LK; Schukken YH; Kruze JV; Bradley AJ; Zadoks RN; Dowson CG;
J Clin Microbiol; 2005; 43 (9):4737-43 2005 Sep PMID:16145135
Pooled association genome scanning: validation and use to identify addiction vulnerability loci in two samples.
Liu QR; Drgon T; Walther D; Johnson C; Poleskaya O; Hess J; Uhl GR;
Proc Natl Acad Sci U S A; 2005; 102 (33):11864-9 2005 Aug 9 PMID:16091475

FAQ

Can MinElute 96 UF PCR be used to purify PCR samples which contain mineral oil?
We do not recommend the use of samples containing mineral oil since mineral oil will not be removed during the purification procedure.
FAQ ID -360
Can I use a partial MinElute 96 UF plate?

Yes, you may use part of the MinElute 96 UF Plate, and use the rest of the plate later. In contrast to silica membrane based plates, the unused part of the UF plate does not need to be taped off. We do not recommend to re-use MinElute 96 UF Plates more than 2-4 times.

 

FAQ ID -355
Do you have a protocol for concentration of RNA in 96-well plates?

Yes, please follow the User-Developed Protocol 'Concentration of RNA in 96-well plates using the MinElute 96 UF PCR Purification Kit' (RN03).

 

FAQ ID -1546