FlexiGene DNA Kit

1本のチューブ中での全血、バフィコート、培養細胞からのゲノムDNA単離用

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FlexiGene DNA Kit (250)

Cat. No. / ID:   51206

For isolation of genomic DNA from whole blood, buffy coat, and cultured cells in a single tube with fast kit preparation
PLN 2,580.00
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This product contains substances regulated under REACH (EC 1907/2006 Annex XIV). The use of this product in the EU is permitted subject to an exemption (Article 56(3)). Please refer to the REACH notification and the SDS of this product, both of which can be found in the “Resources” section of this page, for more information.
FlexiGene DNA Kitは分子生物学的アプリケーション用であり、疾病の診断、予防、あるいは治療に使用することはできません。

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特徴

  • 簡便な操作でサンプルの取り違えのリスクなし
  • 0.1~20 ml(全血)の幅広いスタートサンプル量からの精製
  • 全血、バフィコート、培養細胞から直接精製
  • 迅速なプロトコール
  • 有機溶媒抽出不要

製品詳細

FlexiGene DNA Systemは簡単な遠心操作により、全血、バフィコート、培養細胞から高純度DNA を精製します。FlexiGene DNA KitにはバッファーとQIAGEN Proteaseが添付されており、1本のチューブ内で簡単に精製できます。FlexiGene試薬を用いた自動化ソリューションに関しては、倉敷紡績株式会社にお問い合わせください。

パフォーマンス

FlexiGene systemを用いて精製されたDNAのサイズは最大150 kbです(図" 高品質なゲノムDNA")。精製DNAは、増幅およびサザンブロット法の実験で優れたパフォーマンスを示し、長期保存にも適しています(図" 効率的なダウンストリームPCR解析")。

1本のチューブ内で、全血0.1~20 ml、バフィコート0.1~2 ml、培養細胞1~2 x 106個からDNAを精製し、遠心操作による処理も可能です。12サンプルを1時間で調製できます。サンプルサイズによって、再水和容量は0.2~1 mlになります。

FlexiGene製法を用いて様々なサンプルタイプから精製されたDNAの収量
サンプル  
容量
DNA収量(µg)
血液*  
0.3 ml
11-14
血液*  
2.0 ml
75-90
血液*  
10.0 ml
 
380-460
バフィコート  
0.5 ml
 
110-130
HeLa細胞  
106
 
25-35

*白血球数が正常な全血(7 x 106個/ml血液)。

図参照

原理

FlexiGene DNAシステムは様々な量の全血、バフィコート、培養細胞からのゲノムDNA単離を可能にします。1本のチューブ中で簡単に精製操作を行なうことができるので、経費を節約し、取り扱いが容易になります。精製DNAは感度の高いアプリケーションに最適です。

操作手順

最初のステップでは溶解バッファーをサンプルに添加します(フローチャート" FlexiGene DNA操作手順")。細胞核とミトコンドリアを遠心操作によりペレット化し、QIAGEN Proteaseを含む変性バッファーに再懸濁します。タンパク質分解に続き、イソプロパノールの添加によりDNAを沈殿させ、遠心操作により再回収し、70%エタノールで洗浄、乾燥します。水性バッファーにDNAを再懸濁し、ダウンストリームアッセイに直接使用するか-20℃で保存します。全血、バフィコート、培養細胞から高い収量でDNAが得られます(表"FlexiGene製法を用いて様々なサンプルタイプから精製されたDNAの収量")。
図参照

アプリケーション

FlexiGene DNA Kitを用いて精製したDNAは以下のようなダウンストリームアプリケーションに最適です。

  • PCR
  • サザンブロット法
  • アーカイビング

裏付けデータと数値

Specifications

FeaturesSpecifications
ApplicationsJAPCR techniques, restriction digest, Southern blotting, sequencing
Sample amount100 µl - 20 ml
FormatScalable
Time per run or per prep25 - 45 minutes (+ DNA rehydration)
Main sample typeWhole blood, buffy coat, cultured cells
TechnologySingle tube precipitation method
ProcessingManual
Yield35 µg / ml whole blood
Purification of total RNA, miRNA, poly A+ mRNA, DNA or proteinGenomic DNA
Elution volume200 µl - 1000 µl

リソース

キットハンドブック (1)
For purification of DNA from human whole blood, buffy coat, cultured cells
Supplementary Protocols (1)
This protocol is designed for purification of DNA from up to 10 ml clotted blood using the FlexiGene DNA Kit.
追加リソース (1)
7 years storage at 2-8°C and -20°C
MSDS (1)
Download Safety Data Sheets for QIAGEN product components.
Certificates of Analysis (1)

Publications

The (TAAAA)n microsatellite polymorphism in the SHBG gene influences serum SHBG levels in women with polycystic ovary syndrome.
Ferk P; Teran N; Gersak K;
Hum Reprod; 2006; 22 (4):1031-6 2006 Dec 22 PMID:17189294
A functional SNP of interferon-gamma gene is important for interferon-alpha-induced and spontaneous recovery from hepatitis C virus infection.
Huang Y; Yang H; Borg BB; Su X; Rhodes SL; Yang K; Tong X; Tang G; Howell CD; Rosen HR; Thio CL; Thomas DL; Alter HJ; Sapp RK; Liang TJ;
Proc Natl Acad Sci U S A; 2007; 104 (3):985-90 2007 Jan 10 PMID:17215375
Lipopolysaccharide-activated CD4+CD25+ T regulatory cells inhibit neutrophil function and promote their apoptosis and death.
Lewkowicz P; Lewkowicz N; Sasiak A; Tchórzewski H;
J Immunol; 2006; 177 (10):7155-63 2006 Nov 15 PMID:17082633
Predictors of vitamin B6 and folate concentrations in older persons: the InCHIANTI study.
Gori AM; Sofi F; Corsi AM; Gazzini A; Sestini I; Lauretani F; Bandinelli S; Gensini GF; Ferrucci L; Abbate R;
Clin Chem; 2006; 52 (7):1318-24 2006 May 11 PMID:16690736
Past adult lead exposure is linked to neurodegeneration measured by brain MRI.
Stewart WF; Schwartz BS; Davatzikos C; Shen D; Liu D; Wu X; Todd AC; Shi W; Bassett S; Youssem D;
Neurology; 2006; 66 (10):1476-84 2006 May 23 PMID:16717205

FAQ

Do you have a protocol for purification of DNA from clotted blood using the FlexiGene DNA Kit?

Yes, please follow the User-Developed Protocol 'Purification of DNA from clotted blood using the FlexiGene DNA Kit' (FG01).

 

FAQ ID -973
Do you have stability data for genomic DNA isolated with the Flexigene DNA Kit?

Yes. We have shown that DNA purified with the Flexigene DNA Kit is stable for at least 7 years when being stored at either 2-8°C or -20°C.  However, the DNA stability is dependent upon storage conditions.  The data is available here under Additional Resources.

 

FAQ ID -1317
Do you have a protocol for the isolation of genomic DNA from frozen clotted blood?

Yes, we have the following protocols:

  • Isolation of genomic DNA from frozen clotted whole blood using the QIAGEN Genomic-tip 100/G (QG02). TEST

You will need to prepare the required buffers according to the recipes in Appendix A of the QIAGEN Genomic DNA Handbook, or you can purchase the Genomic DNA Buffer Set containing pre-made solutions. Alternatively, the QIAGEN Blood & Cell Culture Midi Kit, containing Genomic-tips 100/G and buffers, can be used.

  • Purification of archive-quality DNA from clotted whole blood using Clotspin Baskets and the Gentra Puregene Blood Kit (PG03).
  • Purification of archive-quality DNA from clotted whole blood using the Gentra Puregene Tissue Kit or Gentra Puregene Mouse Tail Kit (PG04).
  • Purification of DNA from clotted blood using the FlexiGene DNA Kit (FG01).
FAQ ID -900. Test
What is the composition of Buffer FG3?
Buffer FG3, the hydration buffer supplied in the FlexiGene DNA Kit, is a 10 mM Tris-Cl solution at pH 8.5.
FAQ ID -356