Cat. No. / ID: 203605
このPolymeraseはHotStarTaq DNA Polymeraseの持つ特異性、感度、最小限の至適化と、5分の迅速な活性化時間を組み合わせています。PCRセットアップは室温で行なうことができ、2種類のマーカー色素が入った画期的なCoralLoad PCR Bufferにより、反応液を直接アガロースゲルにロードできます。スタンダードのQIAGEN PCR Bufferも入っているので簡便な操作を実現します。さらに増幅困難なテンプレート(例;GCリッチ)用に画期的なQ-Solutionも入っています。ユニークなキット構成品ならびに至適化済みのプロトコールによりPCR操作が能率的になりました。
HotStarTaq Plus DNA Polymerase | HotStarTaq DNA Polymerase | ホットスタート酵素AII社 | R社 | I社(抗体利用) | マニュアル | ワックスバリア | |
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特異的な増幅 | ++ | ++ | + | ++ | + | +/– | +/– |
最小限のPCR至適化 | ++ | ++ | +/– | +/– | +/– | – | – |
取り扱いの簡便さ | ++ | ++ | ++ | + | + | – | – |
活性化のスピード | ++ | + | ++ | ++ | ++ | – | – |
濃度:5 units/µl
組み換え酵素:Yes
基質アナログ:dNTP、ddNTP、dUTP、biotin-11-dUTP、DIG-11-dUTP、 fluorescent-dNTP/ddNTP
エクステンション速度:72℃ で2~4 kb/min
半減期:97℃で10分、94℃で60分
増幅効率:≥105 倍
5'–>3' エキソヌクレアーゼ活性:Yes
余分なA付加:Yes
3'–>5' エキソヌクレアーゼ活性:No
ヌクレアーゼの混入:No
RNasesの混入:No
プロテアーゼの混入:No
自己プライマー活性:なし
HotStarTaq Plus DNA Polymerase は、わずか5分間の迅速な活性化時間で、従来のHotStarTaq DNA Polymeraseの優れた性能を保持しています。
QIAGEN Taq DNA Polymerase を改良したHotStarTaq Plus Plus DNA Polymerase は、常温では不活性状態でポリメラーゼ活性はありません。この特性により、PCR セットアップや最初のPCR サイクル中の低温での非特異的なプライマーのアニーリングやプライマーダイマーの形成を回避できます(図“ 最高の特異性”および“ 異なるプライマー/テンプレートシステムにおける高特異性”)。HotStarTaq Plus DNA Polymeraseは、95℃、5 分間のインキュベーションステップで活性化され、このステップは既存のサーマルサイクリングのプログラムに容易に導入できます。
QIAGEN PCR Buffer は、各PCRサイクルでアニーリングステップ中にプライマー特異的な結合の割合を非特異的な結合に対して高めることにより、各PCRサイクルの特異的な増幅を維持します(図“ プライマーのアニーリングにおける特異性が増加”)。このバッファーはユニークな配合比のKClと (NH4)2SO4を含み、従来のPCRバッファーに比べ、幅広いアニーリング温度やMg2+濃度の範囲で厳密で特異的なプライマー・アニーリングを実現します。従って、異なるアニーリング温度あるいはMg2+ 濃度を用いて行なうPCRの至適化は最小限ですみ、または不要なこともあります。
HotStarTaq Plus DNA Polymeraseに付属のCoralLoad PCR BufferはQIAGEN PCR Bufferの特長をすべて備え、さらにPCR反応液を直接アガロースゲルにロードできます。 ゲルローディング用バッファーを前もって添加する必要がありません。CoralLoad PCR Bufferは従来のQIAGEN PCR Bufferと同様の高いPCR特異性をもち、反応の至適化は最小限に抑えられます。さらに、これに入っている2種類のマーカー色素(オレンジ色の色素と赤色の色素)により、DNAの移動距離の予測とアガロースゲルの泳動時間の至適化を容易に行なえます(図“ CoralLoad PCR Buffer”)。本バッファーはピペッティングの目視化を改良し、PCR産物をゲルに直接ロードすることが可能なので、簡便性が増加します。
HotStarTaq Plus DNA Polymeraseに添付されている画期的なPCR添加剤であるQ-Solution は、DNA の変性環境を改善し、増幅困難なテンプレートの増幅を可能にします。このユニークな試薬により、高度な二次構造をもつテンプレートやGC リッチなテンプレートなどにより生じる不適切なPCR 条件が改善されることがあります(図“ 増幅困難なテンプレートの増幅”)。DMSOのような汎用されているPCR添加物と異なり、Q-Solutionは一定の濃度で作用し、毒性もなく、PCR純度は保証されています。Q-Solution の添加により、PCR の信頼性は損なわれません。
HotStarTaq Plus DNA Polymeraseは以下のような増幅を含めた高度なアプリケーションをはじめ様々なアプリケーションに最適です。
Features | Specifications |
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ApplicationsJA | PCR, RT-PCR, Complex genomic templates, very low-copy targets |
With/without hotstart | With hotstart |
Sample/target type | Genomic DNA and cDNA |
Enzyme activity | 5' -> 3' exonuclease activity |
Reaction type | PCR amplification |
Single or multiplex | Single |
Mastermix | No |
Real-time or endpoint | Endpoint |