Certal Residual DNA Detection Kits
残留するCHO宿主細胞DNAをプローブベースで高感度に検出、インターナルコントロールを含む
Certal Residual DNA Detection Kits
残留するCHO宿主細胞DNAをプローブベースで高感度に検出、インターナルコントロールを含む
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Cat. No. / ID: 211822
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バイオ医薬品を扱う際に、宿主細胞からの残留DNAなどの夾雑物が混在していないことを保証するために、最終的な治療材料を評価することが不可欠です。Certal Residual DNA Detection Kitは、二重標識された加水分解(またたTaqManとしても知られる)用プローブを用いて、残留した宿主細胞ゲノムDNAの高感度で迅速なリアルタイム定量PCR用に設計されています。Certal CHO Detection Kitには、残留したCHO宿主細胞DNAとさらにCertal Internal ControlのduplexリアルタイムPCR検出のための試薬が含まれています。キットはまた、CHO宿主細胞DNAからのシグナルがない状態でPCRアッセイの機能性を検証するCertal Residual DNA Positive Control、またほとんどののリアルタイムPCR装置での使用を可能にするROX passive reference dyeが2種類の異なる濃度で入っています。
Certal Residual DNA Detection Kitは、安全かつ信頼性の高いバイオ医薬品の生産のために不可欠である残留ゲノムDNA(gDNA)を高い感度と信頼性で検出・定量できます(図 “ 高感度で信頼性の検出"を参照”)。Certal CHO Detection Kitは、CHO(Chinese Hamster Ovary)細胞からの残留gDNAを低い検出限度と高い直線性で検出し、微量の残留gDNAでさえ高い信頼性で検出できます。(図 “ 低い検出限界”)。Certal Residual DNA Detection Kitは広範なサイクラーで使用でき、感度と信頼性の高いデータを提供します(“ 様々なサイクラーで感度と信頼性の高い検出”および“ Rotor-Gene QでCHOゲノムDNAの感度と信頼性の高い検出”)。
プロセスの高い安全性を確保するため、Certal Residual DNA Detection Kitは、特に陰性結果を正確に解析し、ターゲットアッセイを妨害しないように設計されたQIAGEN Internal Controlが含まれています。QIAGEN Internal ControlがゲノムDNAと一緒に増幅されると高い信頼性で検出されます(図“ QIAGEN Internal Controlの信頼性の高い検出”)。
バイオ医薬品を製造するために使用される宿主細胞株から混入物質がないことを最終的な治療材料で確認するために、Certal Residual DNA Detection Kitは、特にCHO宿主細胞DNAを検出するようにあらかじめデザインされたアッセイを提供します。各Certal Residual DNA Assayは最適化されたプライマーペア及びFAM標識加水分解プローブで構成され、残留CHOゲノムDNAの信頼できる検出を実現します。ヒトのバックグランドDNAおよびCertal Internal Control DNAはCertal Residual DNA Assayを妨害しません。
混和済みCertal Internal Control Assayは、Certal Internal Control DNA検出のためのforwardおよびreverseプライマーとMAX標識加水分解プローブを含んでいます。これは特に、Certal Residual DNA Assayを妨害しないように最適化されています。Certal Residual DNA Positive Control は、増幅反応自体の機能をテストすることによって、陰性結果を正しく解釈することができます。
Certal ResDNA PCR Bufferは感度と信頼性の高いduplex リアルタイム定量PCR結果を提供するために最適化されています。マスターミックスはまたdUTPを含み、PCR 開始前にUNG(uracil-N-glycosylase) で前処理することにより、PCR 増幅産物のコンタミは分解され、続いて行なうPCR に影響を与えません。
成分 | 特長 | 利点 |
---|---|---|
Certal Residual DNA Assays およびコントロールDNA | ||
50x Certal Residual DNA Assay | デザイン済み、至適化済み、検証済みのプライマープローブセット(FAM標識) | 残留したCHO宿主細胞DNAの信頼できる検出 |
Certal Residual DNA Positive Control | Certal Residual DNA Assayにより増幅されるポジティブコントロールDNA | サンプル中に残留した宿主細胞DNAが検出されない場合に、Certal Residual DNA Assayが正しく作動していることを検証 |
50x Certal Internal Control Assay | Certal Internal Control DNA検出用にデザイン済み、至適化済み、検証済みのプライマー・プローブセット(MAX 標識) | Certal Internal Control DNAのみの特異的な検出。Certal Residual DNA Assayを妨害しないように最適化 |
Certal Internal Control DNA | Certal Internal Control Assayにより増幅されるInternal Control DNA | PCR阻害物質の存在を排除または精製ステップ中に添加された場合は精製および増幅のコントロールに使用可能 |
Certal ResDNA PCR Master Mix | ||
HotStarTaq DNA Polymerase | 95℃、15分の活性化 | 室温での定量PCRのセットアップ |
Certal ResDNA PCR Buffer | KClおよび(NH4)2SO4 イオンのバランスのとれた組み合わせ | 特異性の高いプライマーのアニーリングで信頼性の高いPCR結果 |
合成添加剤Factor MP | 同一チューブ中の最高4遺伝子を高い信頼性でマルチプレックス解析 | |
dNTPミックス | 一部dTTPの代わりにdUTPを含むので、オプションのUNG処理が可能 | Uracil-N-glycosylase(UNG) で前処理することにより、PCR 産物の混入を効率的に排除 |
追加の成分 | ||
50x ROX Dye Solution | Applied Biosystems 7500リアルタイムPCR装置での蛍光補正用にpassive reference dye が別途包装。オプション:AgilentのStratagene 装置で使用可能 | ROX色素が必要なサイクラーで正確な定量。どのリアルタイムサイクラーでのPCRを妨害しない |
50x High-ROX Dye Solution | Applied Biosystems 7900およびStepOneリアルタイムPCR装置での蛍光補正用にpassive reference dye が別途包装 | |
Uracil-N-Glycosylase(UNG) | 高純度なヌクレアーゼフリーの組み換え酵素(別チューブ) | PCR 産物の混入を効率的に排除 |
QuantiTect Nucleic Acid Dilution Buffer | 核酸スタンダードの希釈および保存に最適な独自のバッファー組成 | 希釈や反応セットアップ中のRNAやDNAスタンダードを安定化し、チューブやピペットチップのようなプラスチック表面への核酸の吸着を防止 |
Certal Residual DNA Detection Kitは、宿主細胞のDNA、Certal Internal Control、及びCertal Residual DNA Positive Controlを検出するための簡単な操作を提供します(図“ Certal Residual DNA Detection Kit 操作手順”)。Certal Residual DNA Assay、Certal Internal Control Assay、およびCertal Internal Control DNAをマスターミックスと混和し、その後、DNAサンプルまたはCertal Residual DNA Positive Controlを追加混和します。本キットのハンドブックには様々なサイクラーで使用可能な至適化ずみプロトコールが入っています。ROXは2種類の濃度でお届けし、ほとんどのリアルタイム装置で使用可能です(表“適切なROXの濃度の選択”)。
ROX Dye Solution | |||
装置 | 不要 | ROX Dye Solution | High-ROX Dye Solution |
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Rotor-Gene Q | X | ||
Rotor-Gene 6000およびRotor-Gene 3000 | X | ||
Applied Biosystems 7500, ABI ViiA7 | X | ||
Applied Biosystems 7900HT, StepOne and StepOne Plus, ABI PRISM 7700, 7000 and 7300 | X | ||
Mx3000P, Mx3005P, Mx4000 | X | オプション | |
iCycler iQ System | X | ||
LightCycler 480 | X |
Certal Residual DNA Detection Kitは、配列特異的なプローブを使用した高感度リアルタイムPCRにより、インターナルコントロールを含む宿主細胞DNAの検出を実現します。本キットはQIAGEN、Applied Biosystems、Bio-Rad、Roche、Agilentなど様々なリアルタイム用サーマルサイクラー上で使用できます。
Primers and probe for the target (CHO) assay and the internal control assay are added to the Certal ResDNA Master Mix. Once internal control template and sample template is added and reactions are distributed, they can be run using a wide range of cyclers. Optionally, positive CHO controls can be tested, and UNG may be used to control for carryover contamination of PCR products.