์นดํ๋ก๊ทธ ๋ฒํธ / ID. 208252
ํฅ์๋ ํน์ด์ฑ, ๋ฏผ๊ฐ๋, ์๋, ์ฒ๋ฆฌ ์์ ์ฑ์ ํน์ง์ผ๋ก ํ๋ QuantiNova SYBR Green PCR Kit(SYBR qPCR ํคํธ)๋ SYBR Green ๊ธฐ๋ฐ qPCR์ ์๋ก์ด ํ์ค์ ์ ์ํฉ๋๋ค. ์๋ก์ด hot-start ๋ฉ์ปค๋์ฆ์ด real-time PCR์ ํน์ด์ฑ์ ํฌ๊ฒ ํฅ์์ํค๊ณ ์ต์ ํ๋ ํํ ๋ฐ์์ผ๋ก ๋ชจ๋ real-time PCR ์ฌ์ดํด๋ฌ์์ ๋จ์ผ ํ์ ์นดํผ๊น์ง ๊ฒ์ถํ์ฌ cDNA ๋๋ gDNA๋ก๋ถํฐ ์ ํํ ์ ๋์ ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ์ ๊ณตํฉ๋๋ค. ๋ง์ง๋ง์ผ๋ก, ๋ด์ฅ๋ ์๊ฐ์ ์งํ๊ฐ ์ฌ๋ฐ๋ฅธ ํผํซํ ์ ๋ณด์ฅํฉ๋๋ค.
QuantiNova Probe PCR Kit(ํ๋ก๋ธ qPCR ํคํธ)๋ฅผ ์ฌ์ฉํ๋ฉด ์ ์จ์์ ์๋ชป๋ ํ๋ผ์ด๋ฐ์ผ๋ก ์ธํ ์ ์ํฅ์ ํผํ ์ ์์ต๋๋ค. ์ด ํคํธ๋ ์๋ก์ด ํญ์ฒด ๋งค๊ฐ hot-start ๋ฉ์ปค๋์ฆ์ ๊ธฐ๋ฐ์ผ๋ก ํ๋ก๋ธ ๊ธฐ๋ฐ real-time PCR์ ํน์ด์ฑ๊ณผ ํจ์จ์ฑ์ ํฅ์์์ผ ๋ค์ํ real-time PCR ์ฌ์ดํด๋ฌ์์ ์ ํํ ์ฑ๊ธํ๋ ์ค ๋๋ ๋ํ๋ ์ค, cDNA ๋๋ gDNA ๋ถ์์ ์ ๊ณตํฉ๋๋ค. ๋๊ฐ์ ์์ด๋ ์ค์จ์์ ์ต๋ 100์๊ฐ ๋์ ๋งค์ฐ ์์ ์ ์ผ๋ก ์ฌ์ฉํ ์ ์์ด ๋๋ ์ํ ์ฒ๋ฆฌ์ ์๋ํ๋ ์ํฌํ๋ก์ฐ์ ์ด์์ ์ ๋๋ค. ์ ํํ ํผํซํ ์ ์๊ฐ์ ์ผ๋ก ํ์ธํ ์ ์๋ ์ถ์ ์์คํ ์ด ๋ด์ฅ๋์ด ์์ด ์์ฌํ๊ณ ์ฌ์ฉํ ์ ์์ผ๋ฉฐ, ์ ์ ์์ ํ์ ๋ ๋งค์ฐ ๊ณ ๊ฐ๋๋ก ๊ฒ์ถํ์ฌ ํญ์ ์ ๋ขฐํ ์ ์๋ qPCR ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ๋ณด์ฅํฉ๋๋ค.
QuantiNova Multiplex PCR Kits(๋ฉํฐํ๋ ์ค qPCR ํคํธ)๋ ๋ฉํฐํ๋ ์ค, real-time PCR ๋๋ ํฌ์คํ RT-PCR์ ํตํด ๋จ์ผ ํ๋ธ์์ ์ต๋ 5๊ฐ์ cDNA ๋๋ gDNA ํ์ ์ ๋น ๋ฅด๊ณ ์์ ์ ์ผ๋ก ์ ๋ํํ ์ ์์ต๋๋ค. Q-bond ๊ธฐ์ ๊ณผ ์ต์ ํ๋ ๋ง์คํฐ ๋ฏน์ค๊ฐ 1์๊ฐ ์ด๋ด์ ์ด๊ณ ์ ๋ฉํฐํ๋ ์ค real-time PCR์ ์ง์ํฉ๋๋ค. ์ฆ์ ์ฌ์ฉ ๊ฐ๋ฅํ 4x ๋ง์คํฐ ๋ฏน์ค ๋ด์ ๋ ์์ ์ธ hot start ๋ฐ PCR ์์ถฉ์ก ์์คํ ์ ์กฐํฉ์ผ๋ก ์ต์ ํํ ํ์ ์์ด ๋ชจ๋ real-time ์ฌ์ดํด๋ฌ์์ ๋งค์ฐ ๋ฏผ๊ฐํ qPCR์ ๋ณด์ฅํ๋ฉฐ ์ค์จ์์์ ์๋ํ๋ ๋ฐ์ ์ ์ ์ต์ ๋ ์ ๊ณตํฉ๋๋ค. ์ฌ๋ฐ๋ฅธ ํผํซํ ์ ์๊ฐ์ ์ผ๋ก ํ์ธํ ์ ์๋ ์ถ์ ์์คํ ์ด ๋ด์ฅ๋์ด ์์ด ์ธ์ ๊ณผ์ค์ ๋ฐฉ์งํ ์ ์์ผ๋ฉฐ, cDNA ํฉ์ฑ์ ์ํ QuantiNova Reverse Transcription Kit์ ํจ๊ป ์ฌ์ฉํ๋ฉด QuantiNova ๋ด๋ถ ๋์กฐ๋ฌผ์ง RNA๋ฅผ ํฌํจ์์ผ ์ฑ๊ณต์ ์ธ ์ญ์ ์ฌ ๋ฐ qPCR์ ๋ชจ๋ํฐ๋งํ ์ ์์ต๋๋ค.
QuantiNova SYBR Green PCR Kit๋ฅผ ์ฒ์์ผ๋ก ์ฌ์ฉํด ๋ณด๊ณ ์ถ์ผ์ ๊ฐ์? ํ๊ฐํ ํคํธ์ ๊ฒฌ์ ์ ์์ฒญํด ๋ณด์ญ์์ค.
QuantiNova Probe PCR Kit๋ฅผ ์ฒ์์ผ๋ก ์ฌ์ฉํด ๋ณด๊ณ ์ถ์ผ์ ๊ฐ์? ํ๊ฐํ ํคํธ์ ๊ฒฌ์ ์ ์์ฒญํด ๋ณด์ญ์์ค.
QuantiNova Multiplex PCR Kits๋ฅผ ์ฒ์์ผ๋ก ์ฌ์ฉํด ๋ณด๊ณ ์ถ์ผ์ ๊ฐ์? ํ๊ฐํ ํคํธ์ ๊ฒฌ์ ์ ์์ฒญํด ๋ณด์ญ์์ค
์ ํํ ๋ฐ์ ์ ์ ์ ์ํ ์๊ฐ์ ์งํ ๋ด์ฅ
QuantiNova PCR Kits์ ํจ๊ป ์ ๊ณต๋๋ ๋ง์คํฐ ๋ฏน์ค์๋ real-time PCR์ ์ ํดํ์ง ์์ผ๋ฉด์ ํ๋ธ๋ ์ฐ์ ๊ฐ์์ฑ์ ๋์ฌ์ฃผ๋ ๋ถํ์ฑ ํ๋์ ์ผ๋ฃ๊ฐ ํจ์ ๋์ด ์์ต๋๋ค. QuantiNova Yellow ํ ํ๋ฆฟ ํฌ์ ์์ถฉ์ก์๋ ๋ถํ์ฑ ๋ ธ๋์ ์ผ๋ฃ๊ฐ ํจ์ ๋์ด ์์ต๋๋ค. ํ ํ๋ฆฟ ํต์ฐ์ QuantiNova Yellow ํ ํ๋ฆฟ ํฌ์ ์์ถฉ์ก์ ํฌ์ํ์ฌ ๋ง์คํฐ ๋ฏน์ค์ ์ถ๊ฐํ๋ฉด ์ฉ์ก์ ์์ด ํ๋์์์ ์ด๋ก์์ผ๋ก ๋ฐ๋์ด(๊ทธ๋ฆผ โ ์ ํํ ๋ฐ์ ์ ์ ์ ๋ํ๋ด๋ ๋ด์ฅ๋ ํผํซํ ๋์กฐ๋ฌผ์งโ ์ฐธ๊ณ ) ๊ฐ ๋ฐ์์ด ์ฌ๋ฐ๋ฅด๊ฒ ์ ์ ๋์์์ ์๊ฐ์ ์ผ๋ก ํ์ธํ ์ ์์ต๋๋ค.
QuantiNova SYBR Green PCR Kit
QuantiNova SYBR Green PCR Kit๋ ๋์ ๋ฏผ๊ฐ๋๋ก ๋จ์ผ ํ์ ์นดํผ๊น์ง๋ ์ ํํ๊ณ ์์ ์ ์ผ๋ก ๊ฒ์ถํฉ๋๋ค(๊ทธ๋ฆผ โ ๋จ์ผ ์นดํผ ํ์ ์ ์์ ์ ์ธ ๊ณ ๊ฐ๋ ๊ฒ์ถโ ์ฐธ๊ณ ). ์ด ๊ทน๊ฐ์ ๋ฏผ๊ฐ๋๋ ์ด๊ณ ์ ์ฌ์ดํด๋ง ์กฐ๊ฑด์์๋ ์ ์ง๋ฉ๋๋ค.
QuantiNova SYBR Green PCR Kit๋ ๋ค์ํ ์์ ํ ํ๋ฆฟ๊ณผ ํจ๊ป ์ฌ์ฉํ ์ ์์ต๋๋ค. ์ด SYBR real-time PCR ํคํธ์ ์ฑ๋ฅ์ 8์๋ฆฟ์์ ๋ฌํ๋ ๋์ ๋ฒ์(100ng~10fg cDNA)์ ๊ฑธ์ณ ํ ์คํธ๋์์ผ๋ฉฐ ์ฌ์ฉํ ๊ธฐ๊ธฐ์ ๊ด๊ณ์์ด ์ ๋ํ๊ฐ ์ ํํ๊ณ ์์ ์ ์ด์์ต๋๋ค(๊ทธ๋ฆผ โ ๋์ ๋์ ๋ฒ์์ ๊ฑธ์น ์ ํํ ์ ๋ํโ ์ฐธ๊ณ ).
QuantiNova ํํ ๋ฐ์์ ์๊ฒฉํ ํน์ด์ฑ๊ณผ ํ์ํ ๋ฏผ๊ฐ๋๋ QIAGEN Rotor-Gene Q์์ ์ต์ ์ ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ์ ๊ณตํฉ๋๋ค. ๊ทธ๋ฌ๋ ํ์, ๊ณ ์ ์ฌ์ดํด๋ง ์ฑ๋ฅ, ํจ์๋ธ ๊ธฐ์ค ์ผ๋ฃ์ ํ์์ฑ๊ณผ ๊ด๊ณ์์ด ๋ชจ๋ real-time PCR ์ฌ์ดํด๋ฌ์์ ์ฌ์ฉํ ์ ์์ต๋๋ค. QuantiNova SYBR Green PCR Kit์ ํจ๊ป ์ ๊ณต๋๋ ROX๋ ํ์ํ ๊ฒฝ์ฐ ๋ง์คํฐ ๋ฏน์ค์ ์ถ๊ฐํ๊ธฐ๋ง ํ๋ฉด ๋ฉ๋๋ค. Rotor-Gene Q, Agilent Technologies Mx3005P, Applied Biosystems 7900 HT Fast, ViiA 7, StepOnePlus ๋ฐ 7500 Fast, Roche LightCycler 480, Bio-Rad CFX96์ ์ฌ์ฉํ ์ฆํญ ๋ฐ ์ ๋ํ ๊ฒฐ๊ณผ๋ ํญ์ ์์ ์ ์ด๊ณ ๋ฏผ๊ฐํฉ๋๋ค.
QuantiNova SYBR Green PCR Kit๋ ๋ค๋ฅธ SYBR Green PCR ํคํธ์ ๋นํด ์ฐ์ํ ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ์ ๊ณตํฉ๋๋ค. ์ฌ์ดํด๋ง ์กฐ๊ฑด์ด๋ ๊ธฐ๊ธฐ์ ๊ด๊ณ์์ด QuantiNova ํํ ๋ฐ์์ ๋ฎ์ CT ๊ฐ, ๋์ ์ฌํ์ฑ, ๋์ ๋ฐ์ ํจ์จ์ ๋ณด์ฌ์ค๋๋ค.
QuantiNova Yellow ํ ํ๋ฆฟ ํฌ์ ์์ถฉ์ก์ ๋ฐ์ ์ ์ ์ค์ ์์ฌํ๊ณ ์ฌ์ฉํ ์ ์์ง๋ง, QuantiNova SYBR Green PCR Kit๋ก ์ฐ์ํ ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ์ป๊ธฐ ์ํด ๋ฐ๋์ ํ์ํ ๊ฒ์ ์๋๋๋ค. QuantiNova ํํ ๋ฐ์์ ์ ์ฐ์ฑ ์๊ฒ ์ค๊ณ๋์ด ๊ธฐ์กด์ ๋ชจ๋ ์ํฌํ๋ก์ฐ์ ํตํฉํ ์ ์์ต๋๋ค. ๋ฐ๋ผ์ ๊ด์ฌ ์๋ ์ฆํญ ํ์ ๊ณผ ์ฌ์ฉ ๊ธฐ๊ธฐ, ์ ํํ ํฌ์ ์์ถฉ์ก์ ๋ง์ถฐ ์ฑ๋ฅ์ ์ต์ ํํ ์ ์์ต๋๋ค.
QuantiNova Probe PCR Kit
์ด ํ๋ก๋ธ real-time PCR ํคํธ์ real-time PCR ํผํฉ๋ฌผ์ ํ์ ๋ฐ์์ ์ฑ๋ฅ์ ์ ํ์ํค์ง ์๊ณ ์ต๋ 100์๊ฐ ๋์ 30ยฐC์์ ๋ณด๊ดํ ์ ์์ต๋๋ค. ๋๊ฐ์ ๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์ง ์๊ณ ์ค์จ์์ ์ฅ๊ธฐ๊ฐ ๋ณด๊ดํ ํ์๋ ์์ ์ฑ์ด ๋ฐ์ด๋๋ฏ๋ก QuantiNova Probe PCR Kit๋ ๋์ฉ๋์ ์คํ ์ค์ ๋ฐ ํ๋ ์ดํธ ์ ์ฌ ์ฒ๋ฆฌ์ ์ด์์ ์ ๋๋ค(ํ '๋ณด๊ด์ด ๋ฐ์ ์์ ์ฑ์ ๋ฏธ์น๋ ์ํฅ' ์ฐธ๊ณ .
| ํ๊ท CT ๊ฐ | ||||
| QuantiNova Probe PCR Kit | ๊ณต๊ธ์ ์ฒด L์ ํ๋ก๋ธ PCR ํคํธ | |||
| ์(ng) | 0์๊ฐ | 100์๊ฐ | 0์๊ฐ | 100์๊ฐ |
| 10 | 24.37 | 24.49 | 24.35 | 27.49 |
| 1 | 27.78 | 27.90 | 27.77 | 30.97 |
| 0.1 | 31.16 | 30.98 | 31.37 | 34.48 |
| ํ ํ๋ฆฟ ๋์กฐ๊ตฐ ์์ | ๊ฒ์ถ๋์ง ์์ | ๊ฒ์ถ๋์ง ์์ | ๊ฒ์ถ๋์ง ์์ | ๊ฒ์ถ๋์ง ์์ |
30ยฐC์์ 100์๊ฐ ๋ณด๊ด ์ ๊ณผ ํ์ CT ๊ฐ ๋น๊ต. ๋ง์คํฐ ๋ฏน์ค, ํ ํ๋ฆฟ cDNA, ํ๋ผ์ด๋จธ, TNF์ฉ ํ๋ก๋ธ๋ฅผ ํฌํจํ real-time PCR์ 30ยฐC์์ 100์๊ฐ ๋์ ๋ฐฐ์ํ๊ณ ์๋ก ์ค๋นํ ๋ฐ์๋ฌผ๊ณผ ํจ๊ป real-time PCR์์ ์คํํ์ต๋๋ค. 3๊ฐ์ง ๋ค๋ฅธ ํ ํ๋ฆฟ ์์ ๋ํด ์ธ ๋ฒ์ ๋ฐ๋ณต ๋ฐ์์ ํ ์คํธํ์ต๋๋ค. ๊ณต๊ธ์ ์ฒด L์ ํ๋ก๋ธ PCR ํคํธ์ ๋ฌ๋ฆฌ, QuantiNova Probe PCR Kit๋ 30ยฐC์์ ์ํ์ ์ฅ๊ธฐ๊ฐ ๋ณด๊ดํ ํ์๋ CT ๊ฐ์ด ๋ณํ์ง ์์์ต๋๋ค.
QuantiNova Probe PCR Kit๋ ๋์ ๋ฏผ๊ฐ๋๋ก ๋จ์ผ ํ์ ์นดํผ๊น์ง๋ ์ ํํ๊ณ ์์ ์ ์ผ๋ก ๊ฒ์ถํฉ๋๋ค(๊ทธ๋ฆผ โ ๋จ์ผ ํ์ ์นดํผ์ ์์ ์ ์ธ ๊ณ ๊ฐ๋ ๊ฒ์ถโ ์ฐธ๊ณ ). ์ด ํคํธ์ ํจ๊ป ์ ๊ณต๋๋ ํน์ ๋ง์คํฐ ๋ฏน์ค๋ฅผ ์ฌ์ฉํ๋ฉด ๋จ์ผ ํ๋ธ์์ ์๋ก ๋ค์ํ ๋น์จ๋ก ์กด์ฌํ๋ 2๊ฐ์ ํ์ ์ ์ ํํ๊ฒ ์ ๋ํํ ์ ์์ต๋๋ค. ์ด๋ ์๊ฐ๊ณผ ๋น์ฉ์ ์ ์ฝํ๊ณ ํ์ํ ์ํ์ ์์ ์ค์
๋๋ค. ๋ํ, ์ป์ด์ง ๋ํ๋ ์ค PCR ๋ฐ์ดํฐ๋ ์ฑ๊ธํ๋ ์ค PCR์์ ์ป์ ๋ฐ์ดํฐ์ ์ ์ฌํ ์์ค์
๋๋ค.
QIAGEN์ ๋
์ ์ ์ด๊ณ ์
์ฆ๋ ์์ถฉ์ก ๊ธฐ์ ๊ณผ ์๋ก์ด QuantiNova DNA ์คํฉํจ์, QuantiNova ํญ์ฒด, QuantiNova Guard์ ๋
์์ ์ธ ์กฐํฉ์ ๊น๋ค๋ก์ด real-time PCR ๋ถ์์์์กฐ์ฐจ ๋ง์ ๋น์ฉ๊ณผ ์๊ฐ์ด ์์๋๋ ์ต์ ํ ์์
์์ด ํ ๋ฒ์ ์๋๋ง์ผ๋ก real-time PCR ์ฑ๊ณต์ ๋ณด์ฅํฉ๋๋ค(๊ทธ๋ฆผ โ ๊น๋ค๋ก์ด ๋ถ์์์๋ ์ฐ์ํ ๊ฒฐ๊ณผ ๋์ถโ ์ฐธ๊ณ ).
QuantiNova Probe PCR Kit๋ ๋ชจ๋ real-time ์ฌ์ดํด๋ฌ์์ ์ฌ์ฉํ ์ ์์ต๋๋ค. ROX๋ ๋ณ๋์ ํ๋ธ๋ก ์ ๊ณต๋๋ฉฐ ROX๋ฅผ ํจ์๋ธ ๊ธฐ์ค ์ผ๋ฃ๋ก ์ฌ์ฉํ๋ ์ฌ์ดํด๋ฌ๋ฅผ ์ฌ์ฉํ ๊ฒฝ์ฐ ์ถ๊ฐํ ์ ์์ต๋๋ค. ์ด ํคํธ๋ ๋ฏผ๊ฐ๋, ์ฌํ์ฑ, ํจ์จ์ฑ ์ธก๋ฉด์์ ๋ค์ํ ์ฌ์ดํด๋ฌ ๊ฐ์ ๋งค์ฐ ์ผ๊ด๋ ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ์ ๊ณตํฉ๋๋ค. ์๋ก ๋ค๋ฅธ ์ฌ์ดํด๋ฌ์ ๋ค์ํ ๊ณ ์ ์ฌ์ดํด๋ง ์ฑ๋ฅ์ผ๋ก ์ธํด ์ฌ์ดํด๋ง ํ๋กํ ์ฝ์ด ๋ฌ๋ผ์ง๋๋ผ๋ ๊ฒฐ๊ณผ์ ์ผ๊ด์ฑ์ ์ ์ง๋ฉ๋๋ค.
QuantiNova Multiplex PCR Kits
QuantiNova Multiplex PCR Kits์ ํจ๊ป ์ ๊ณต๋๋ ํน์ ๋ง์คํฐ ๋ฏน์ค๋ ๋ฉํฐํ๋ ์ค ๋ฐ์์ ์ ์ํ๊ฒ ์ ์ ํ๊ณ ํ ๋ฒ์ ์๋๋ก ์ฑ๊ณต์ ์ธ ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ์ ๊ณตํ์ฌ ์ฑ๊ธํ๋ ์ค PCR ๋ฐ์ดํฐ์ ์ ์ฌํ ์์ค์ ๋ฉํฐํ๋ ์ค PCR ๋ฐ์ดํฐ๋ฅผ ์ ๊ณตํฉ๋๋ค. ๊ณ ๋์ถ 4x ๋ง์คํฐ ๋ฏน์ค๋ ์ต๋ 800ng์ ํ ํ๋ฆฟ ํฌ์ ๋์ ์์ฉํ ์ ์์ด ์ต๋ 5ํ๋ ์ค ๋ฐ์์์๋ ๋ฐ์ด๋ ๋ฏผ๊ฐ๋๋ฅผ ๋ณด์ฅํฉ๋๋ค. ์ด ํคํธ๋ ํ ํ๋ฆฟ ์์ ์์ ์ฐจ์ด๋ฅผ ๋ช ํํ๊ฒ ๊ตฌ๋ถํ ์ ์์ผ๋ฉฐ, ๋ค์ํ ์์ ํ์ ์ ์ ํํ๊ฒ ์ ๋ํํ ์ ์์ต๋๋ค.
์๋ก์ด ํญ์ฒด ๋งค๊ฐ hot-start ๋ฉ์ปค๋์ฆ์ ๋ฐ์ด๋ ํน์ด์ฑ์ ๋ณด์ฅํ๊ณ ์์จ์์ ๋ฐ์์ ์ ์ ํ ์ ์์ด ์๋ํ๋ ์ ์ฐจ์ ์ด์์ ์ ๋๋ค. ํน๋ณํ ๊ฐ๋ฐ๋ ๊ณ ์ PCR ์์ถฉ์ก์๋ ์ด๋๋ง ๋ฐ ์ฐ์ฅ ์๊ฐ์ ํฌ๊ฒ ์ค์ฌ์ฃผ๋ ์ฒจ๊ฐ์ Q-Bond๊ฐ ํจ์ ๋์ด ์์ด ํ ์๊ฐ ์ด๋ด์ ๋ฉํฐํ๋ ์ค qPCR์ ์ํํ ์ ์์ต๋๋ค. ์๊ฐ์ ํผํซํ ๋์กฐ๋ฌผ์ง์ ์ธ์ ๊ณผ์ค์ ๋ฐฉ์งํ๊ณ ์ฒ๋ฆฌ ์์ ์ฑ์ ๋์ด๋ ๋ฐ ๋์์ด ๋๋ฉฐ, ํนํ ์ ๋ ํฌ์คํ RT-PCR์ ์ํ QuantiNova Reverse Transcription Kit์์ ์ ๊ณตํ๋ ๋ด๋ถ ๋์กฐ๋ฌผ์ง RNA์ ํจ๊ป ์ฌ์ฉํ ๊ฒฝ์ฐ ๋์ฑ ํจ๊ณผ์ ์ ๋๋ค.
QuantiNova Multiplex PCR Kit๋ ์ด๊ณ ์, ํ๋ก์ธ์ค ๋ด ๋์กฐ ๊ด๋ฆฌ๋๋ ๋ฉํฐํ๋ ์ค qPCR์ ์ฌ์ฉํ์ฌ ์ ํ๋ ์ํ ๋ฌผ์ง๋ก๋ถํฐ ๋ ๋ง์ ์ธ์ฌ์ดํธ๋ฅผ ๋์ถํจ์ผ๋ก์จ ์ํฌํ๋ก์ฐ ํจ์จ์ฑ์ ๋์ ๋๋ค.
QuantiNova PCR Kits๋ ์๋ก์ด ํญ์ฒด ๋งค๊ฐ hot-start ๋ฉ์ปค๋์ฆ์ ํตํด ๋งค์ฐ ๋์ ํน์ด์ฑ์ cDNA ๋๋ gDNA ๋ถ์์ ์ ๊ณตํฉ๋๋ค(๊ทธ๋ฆผ โ ์๋ก์ด QuantiNova hot-start ๋ฉ์ปค๋์ฆ์ ์๋ฆฌโ ์ฐธ๊ณ ). ์ ์จ์์ QuantiNova DNA ์คํฉํจ์๋ QuantiNova ํญ์ฒด์ ๋ณตํฉ์ฒด๋ฅผ ์์ ํํ๋ ์๋ก์ด ์ฒจ๊ฐ์ ์ธ QuantiNova Guard์ ์ํด ๋นํ์ฑ ์ํ๋ก ์ ์ง๋ฉ๋๋ค. ์ด๋ hot-start์ ์๊ฒฉ๋๋ฅผ ํฅ์์ํค๊ณ ๋นํน์ด์ ์ผ๋ก ์ด๋๋ง๋ ํ๋ผ์ด๋จธ ๋ฐ ํ๋ผ์ด๋จธ ๋ค์ด๋จธ์ ์ฐ์ฅ์ ๋ฐฉ์งํฉ๋๋ค. 95ยฐC๊น์ง ์จ๋๋ฅผ ์ฌ๋ฆฐ ํ 2๋ถ ์ด๋ด์ QuantiNova ํญ์ฒด์ QuantiNova Guard๊ฐ ๋ณ์ฑ๋๊ณ QuantiNova DNA ์คํฉํจ์๊ฐ ํ์ฑํ๋์ด ์ฆํญ์ด ๊ฐ๋ฅํฉ๋๋ค.
๋ํ QuantiNova ํํ ๋ฐ์์ PCR ๋ฏผ๊ฐ๋์ ํจ์จ์ฑ์ ์์ค ์์ด ์ํฌํ๋ก์ฐ๋ฅผ ๊ฐ์ํํ๋ ๊ธฐ๋ฅ์ ํฌํจํ๊ณ ์์ต๋๋ค. ๋ง์คํฐ ๋ฏน์ค๊ณผ QuantiNova Yellow ํฌ์ ์์ถฉ์ก์ ๋ถํ์ฑ ์ผ๋ฃ๋ ๊ฐ ๋ฐ์์ด ์ฌ๋ฐ๋ฅด๊ฒ ์ ์ ๋์๋์ง ์๊ฐ์ ์ผ๋ก ํ์ธํ ์ ์๋ ์งํ ์ญํ ์ ํฉ๋๋ค. ํ๋์ ๋ง์คํฐ ๋ฏน์ค๋ ๋ฐ์ ์ฉ๊ธฐ ๋ด ๋ด์ฉ๋ฌผ์ ๊ฐ์์ฑ์ ๋์ฌ์ฃผ๋ฉฐ QuantiNova Yellow ํฌ์ ์์ถฉ์ก์ ํฌ์๋ ํ ํ๋ฆฟ ํต์ฐ์ ์ถ๊ฐํ๋ฉด ์ด๋ก์์ผ๋ก ๋ณํฉ๋๋ค(๊ทธ๋ฆผ โ ์ ํํ ๋ฐ์ ์ ์ ์ ๋ํ๋ด๋ ๋ด์ฅ๋ ํผํซํ ๋์กฐ๋ฌผ์งโ ์ฐธ๊ณ ). QuantiNova SYBR PCR Kits์ ํฌํจ๋ PCR ์์ถฉ์ก์ ๋ ์์ ์ธ ๋ฐฐํฉ์ hot-start ๋ฉ์ปค๋์ฆ์ ์๊ฒฉ๋๋ฅผ ํฅ์์ํค๊ณ ์ฌ์ดํด ๋จ๊ณ๋ฅผ ๋จ์ถํ์ฌ PCR์ ๋ ๋น ๋ฅด๊ฒ ์ํํ๊ณ ์ฒ๋ฆฌ๋์ ๋๋ฆด ์ ์์ต๋๋ค.
QuantiNova Multiplex PCR Kits๋ ์ต์ ํ ์์ด ํ์ค ๋ฐ ๊ณ ์ ์ฌ์ดํด๋ฌ ๋ชจ๋์์ ์ฌ์ฉํ์ ๋ ๋์ ๋์ ๋ฒ์์์ ๋งค์ฐ ๋ฏผ๊ฐํ๊ณ ์ ์ํ ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ์ ๊ณตํฉ๋๋ค. ํน๋ณํ ๊ฐ๋ฐ๋ ๊ณ ์ PCR ์์ถฉ์ก์๋ ์ด๋๋ง ๋ฐ ์ฐ์ฅ ์๊ฐ์ ํฌ๊ฒ ์ค์ฌ์ฃผ๋ ์ฒจ๊ฐ์ Q-Bond๊ฐ ํจ์ ๋์ด ์์ต๋๋ค(๊ทธ๋ฆผ ' ๊ณ ์ ํ๋ผ์ด๋จธ ์ด๋๋ง' ์ฐธ๊ณ ).
์ฐธ์กฐ ์ ์ ์์ ํ์ ์ ์ ์๋ฅผ ๊ฐ๋ณ ๋ฐ์์ด ์๋ ๊ฐ์ ๋ฐ์์์ ์ฆํญํ๋ฉด ์กฐ์ ์ค๋ฅ๋ฅผ ์ต์ํํ์ฌ ์ ์ ์ ์ ๋ํ์ ์ ๋ขฐ์ฑ์ ๋์ผ ์ ์์ต๋๋ค. ๋ํ ์ ๋์ ํฌ์คํ RT-PCR์ ์ํ QuantiNova Reverse Transcription Kit์์ ์ ๊ณต๋๋ ๋ด๋ถ ๋์กฐ๊ตฐ RNA๋ฅผ ํ์ฉํ์ฌ ์ฑ๊ณต์ ์ธ ์ญ์ ์ฌ ๋ฐ qPCR์ ๋ชจ๋ํฐ๋งํ ์ ์์ต๋๋ค.
QuantiNova Multiplex PCR ์์ถฉ์ก์๋ ๊ท ํ ์กํ ์กฐํฉ์ K+ ๋ฐ NH4+ ์ด์จ๊ณผ ๊ณ ์ ํ ํฉ์ฑ ์ธ์ MP๊ฐ ํฌํจ๋์ด ์์ด ํ๋ผ์ด๋จธ์ ํ๋ก๋ธ๋ฅผ ํต์ฐ ํ
ํ๋ฆฟ์ ์์ ์ ์ด๊ณ ํจ์จ์ ์ผ๋ก ์ด๋๋งํ์ฌ ๋์ PCR ํจ์จ์ ๊ฐ๋ฅํ๊ฒ ํฉ๋๋ค(๊ทธ๋ฆผ ' ์์ ์ ์ด๊ณ ํจ์จ์ ์ธ ์ด๋๋ง์ ์ด์งํ๋ ๊ณ ์ ํ ๋ฉํฐํ๋ ์ค PCR ์์ถฉ์ก' ์ฐธ๊ณ ).
QuantiNova Multiplex PCR Kit ๋ง์คํฐ ๋ฏน์ค๋ 2~8ยฐC์์ ์ต๋ 12๊ฐ์๊น์ง ํธ๋ฆฌํ๊ฒ ๋ณด๊ดํ ์ ์์ผ๋ฉฐ, ์ค์จ์์๋ ๋ฐ์ ์
์
์ด ๋งค์ฐ ์์ ์ ์ด์ด์ ์๋ํ๋ ์ ์ฐจ๋ฅผ ํตํด ํจ์จ์ฑ๊ณผ ์ ํ์ฑ์ ๋์ผ ์ ์์ต๋๋ค.
QuantiNova PCR Kits์๋ ๋ฐ์ ๋ฐ ์ฌ์ดํด๋ง ์กฐ๊ฑด์ ์ต์ ํํ ํ์๊ฐ ์๋ ์ฆ์ ์ฌ์ฉ ๊ฐ๋ฅํ ๋ง์คํฐ ๋ฏน์ค๊ฐ ํฌํจ๋์ด ์์ต๋๋ค. ๊ฐ๋จํ ๋ง์คํฐ ๋ฏน์ค์ ํ ํ๋ฆฟ gDNA ๋๋ cDNA์ ํ๋ผ์ด๋จธ(SYBR Green ๊ธฐ๋ฐ ๊ฒ์ถ) ๋๋ ํ ํ๋ฆฟ gDNA ๋๋ cDNA, ํ๋ผ์ด๋จธ์ ํ๋ก๋ธ(ํ๋ก๋ธ ๊ธฐ๋ฐ ๊ฒ์ถ)๋ฅผ ์ถ๊ฐํ๊ธฐ๋ง ํ๋ฉด ์๋ด์์ ํ๋กํ ์ฝ์ ๋ฐ๋ผ ๋ชจ๋ real-time ์ฌ์ดํด๋ฌ์์ ๋น ๋ฅด๊ณ ์์ ์ ์ธ ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ์ป์ ์ ์์ต๋๋ค. ROX ํจ์๋ธ ๊ธฐ์ค ์ผ๋ฃ๋ ๋ณ๋์ ํ๋ธ๋ก ์ ๊ณต๋๋ฉฐ ์ฌ์ฉํ๋ ์ฌ์ดํด๋ฌ์ ์ ํ์ ๋ฐ๋ผ ์ผ๋ฃ์ ๋๋๋ฅผ ์กฐ์ ํ ์ ์์ต๋๋ค. ๋ฐ๋ผ์ QuantiNova PCR Kits๋ ํ์์ด๋ ์ฌ์ดํด๋ง ์กฐ๊ฑด๊ณผ ๊ด๊ณ์์ด ๊ฑฐ์ ๋ชจ๋ real-time ์ฌ์ดํด๋ฌ์์ ์ฌ์ฉํ ์ ์์ต๋๋ค. ROX ๋๋๊ฐ ์ต์ ํ๋์ด ์์ด ์๋ ๋ฐ์ดํฐ ๋ถ์์ ํตํด ์ ์ ๋ณต์ ์๊น์ง๋ ๊ฒ์ถํ ์ ์์ต๋๋ค.
QuantiNova Multiplex PCR Kits์๋ ๋ฐ์ ๋ฐ ์ฌ์ดํด๋ง ์กฐ๊ฑด์ ์ต์ ํํ ํ์๊ฐ ์๋ ์ฆ์ ์ฌ์ฉ ๊ฐ๋ฅํ 4x ๋ง์คํฐ ๋ฏน์ค๊ฐ ํฌํจ๋์ด ์์ต๋๋ค. ๋ง์คํฐ ๋ฏน์ค์ ์ต๋ 800ng์ ํ ํ๋ฆฟ DNA์ ํ๋ผ์ด๋จธ-ํ๋ก๋ธ ์ธํธ๋ฅผ ์ถ๊ฐํ๊ณ ์๋ด์์ ํ๋กํ ์ฝ์ ๋ฐ๋ผ ์งํํ๋ฉด ๋ชจ๋ real-time ์ฌ์ดํด๋ฌ์์ ๋น ๋ฅด๊ณ ์ ๋ขฐํ ์ ์๋ ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ์ป์ ์ ์์ต๋๋ค. ํคํธ์๋ ๋ณ๋์ ํ๋ธ ์์ ROX ํจ์๋ธ ๊ธฐ์ค ์ผ๋ฃ๊ฐ ํฌํจ๋์ด ์์ด ๊ธฐ๊ธฐ์์ ํ์๋ก ํ๋ ๊ฒฝ์ฐ ์ ์ ํ ROX ๋๋๋ฅผ ์กฐ์ ํ ์ ์์ต๋๋ค.
Real-time ํฌ์คํ RT-PCR์์ ์ต์ ์ ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ์ป์ผ๋ ค๋ฉด ์ ์ ์ฒด DNA ์ค์ผ์ ํตํฉ ์ ๊ฑฐํ์ฌ ๋จ 20๋ถ ๋ง์ ๋น ๋ฅด๊ฒ cDNA๋ฅผ ํฉ์ฑํ ์ ์๋ QuantiNova Reverse Transcription Kit๋ฅผ ์ฌ์ฉํ cDNA ํฉ์ฑ์ ๊ถ์ฅํฉ๋๋ค. ์ถ๊ฐ๋ก QuantiNova ๋ด๋ถ ๋์กฐ๋ฌผ์ง RNA๋ฅผ ์ ๊ณตํ์ฌ ์ฑ๊ณต์ ์ธ ์ญ์ ์ฌ ๋ฐ qPCR์ ํ๋ก์ธ์ค ๋ด ๋ชจ๋ํฐ๋ง์ด ๊ฐ๋ฅํฉ๋๋ค.
๊ฐ์ํ๋ ์ํฌํ๋ก์ฐ๋ฅผ ์ํด QuantiNova Kits์ ์ฌ์ ์ค๊ณ๋ QuantiNova real-time PCR ๋ถ์ ๋๋ ํจ๋์ ํจ๊ป ์ฌ์ฉํ ๊ฒ์ ๊ถ์ฅํฉ๋๋ค. ์ด ์๋ฃจ์ ์ ํจ๋๊ณผ ๊ด๊ณ์์ด mRNA ๋๋ ๊ธด non-coding RNA ์ ์ฌ๋ฅผ ์ ํํ๊ฒ ์ ๋ํํ ์ ์์ต๋๋ค. ์ฌ์ ์ค๊ณ๋ ๋ค์ํ ์ฌ๋, ๋ง์ฐ์ค, rat ํ๋ผ์ด๋จธ ์ธํธ ์ค์์ ์ ํํ๊ฑฐ๋ ๊ณ ๊ธ ์ค๊ณ ๋๊ตฌ๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์ฌ ์์ ๋ง์ ๋ถ์ ๋ฐ ํจ๋์ ๋ง์ถค ์ค๊ณํ ์ ์์ต๋๋ค.
QuantiNova LNA PCR ๋ฐ QuantiNova LNA Probe PCR Assays๋ LNA ๊ธฐ์ ์ ํ์ฉํ์ฌ ๋ฏผ๊ฐ๋๋ฅผ ํฅ์์์ผ ํธํฅ๋์ง ์์ ์ ์ ์ ๋ฐํ ํ๋กํ์ผ๊ณผ ๋ ์ ์ํ ๊ณผํ์ ์ธ์ฌ์ดํธ๋ฅผ ์ ๊ณตํฉ๋๋ค.
QuantiNova SYBR Green PCR Kit๋ cDNA ํ์ ์ SYBR Green ๊ธฐ๋ฐ ์ ์ ์ ๋ฐํ ๋ถ์ ๋ฐ ์ ๋์ gDNA ๋ถ์์ ์ํด ๋ชจ๋ real-time ์ฌ์ดํด๋ฌ์์ ์ฌ์ฉํ ์ ์์ต๋๋ค. ์ฌ๊ธฐ์๋ Applied Biosystems, Bio-Rad, Cepheid, Eppendorf, LIFE Technologies, Roche, Agilent์ ๊ธฐ๊ธฐ์ Rotor-Gene Q๊ฐ ํฌํจ๋ฉ๋๋ค.
QuantiNova Probe PCR Kits๋ cDNA ํ์ ์ ํ๋ก๋ธ ๊ธฐ๋ฐ ์ ์ ์ ๋ฐํ ๋ถ์ ๋ฐ ์ ๋์ gDNA ๋ถ์์ ์ํด ๋ชจ๋ real-time ์ฌ์ดํด๋ฌ์์ ์ฌ์ฉํ ์ ์์ต๋๋ค. ์ฌ๊ธฐ์๋ Applied Biosystems, Bio-Rad, Cepheid, Eppendorf, Roche, Agilent์ ๊ธฐ๊ธฐ๊ฐ ํฌํจ๋ฉ๋๋ค.
QuantiNova Multiplex PCR Kits๋ cDNA ๋๋ gDNA ํ์ ์ ๋ฉํฐํ๋ ์ค ์ ์ ์ ๋ฐํ ๋ถ์์ ์ํด ๋ชจ๋ real-time ์ฌ์ดํด๋ฌ์์ ์ฌ์ฉํ ์ ์์ต๋๋ค. ๋ฉํฐํ๋ ์ค์ ์ด์ ์ ์ต๋ํ ํ์ฉํ๋ ค๋ฉด Rotor-Gene Q์ ๊ฐ์ด ์ต๋ 5ํ๋ ์ค ์ฑ๋ฅ์ ์ง์ํ๋ ๊ธฐ๊ธฐ๋ฅผ ๊ถ์ฅํฉ๋๋ค.
