therascreen BRAF RGQ PCR Kit CE

用于定性检测KRAS原癌基因的体细胞突变

Products

therascreen BRAF RGQ PCR Kit CE可在欧洲用于体外诊断。

特点

符合欧洲体外诊断98/79/EC指令
灵敏检测低水平突变DNA
即用型系统，简单的工作流程
利用ARMS和Scorpions技术进行选择性、灵敏的检测

产品详情

therascreen BRAF RGQ PCR Kit是分子检测试剂盒，可通过在Rotor-Gene Q 5plex HRM instrument上的real-time PCR检测BRAF基因的体细胞突变。此试剂盒包含所有必需的试剂，优化后可在野生型基因组DNA背景下快速、灵敏的检测低百分比的突变DNA。ARMS PCR技术配合Scorpions检测技术，可对特定突变进行高灵敏度和特异性的检测。

原理

therascreen BRAF RGQ PCR Kit是一种即用型试剂盒，可在Rotor-Gene Q 5plex HRM仪器上利用聚合酶链反应（PCR）检测BRAF基因的体细胞突变。BRAF基因编码V-raf小鼠肉瘤病毒癌基因同源物激酶B1，是EGFR下游的原癌基因。此试剂盒可定性检测BRAF原癌基因的体细胞突变，模板是从福尔马林固定、石蜡包埋（FFPE）样本中提取的基因组DNA。

therascreen BRAF RGQ PCR Kit可在野生型基因组DNA背景下检测以下突变。

V600E (GAG)和V600E复合物(GAA)
V600D (GAT)
V600K (AAG)
V600R (AGG)

此试剂盒可检测V600E（GAG）和V600E（GAA）复合物，但并不能区分二者。

therascreen BRAF RGQ PCR Kit利用两种技术，即ARMS（Amplification Refractory Mutation System）和Scorpions，通过real-time PCR检测突变

ARMS

通过ARMS可进行等位基因或突变特异性扩增。Taq DNA聚合酶可有效区分PCR引物3'端的搭配与错配。特定突变序列被选择性扩增，即使样本中大部分序列都不含有此突变。当引物完全搭配时，扩增过程非常高效。当3'端碱基错配时，只有低水平背景扩增发生。

Scorpions

使用Scorpions检测扩增。Scorpions是双功能分子，含有一个共价连接到探针上的PCR引物。探针上的荧光基团与同样在探针上的淬灭基团相互作用，降低了荧光强度。PCR过程中，当探针结合到扩增子上时，荧光基团和淬灭基团就会分开，导致反应管中荧光强度增加。

程序

therascreen BRAF RGQ PCR Kit包括一个两步操作流程。第一步是对照分析，以检测样本中的总DNA。第二步是突变分析，以检测是否存在突变的DNA。

应用