Enzymes, NGS, Black male pipetting in front of computer screen in a laboratory environment
分子生物学用酶试剂

RNA 分析

有一套酶试剂可用于操纵 RNA 以进行基因表达的下游分析。逆转录酶从转录物中产生互补 DNA (cDNA)。可以对 cDNA 进行标记或扩增用于克隆或定量研究。RNA 连接酶可以连接碱基、标签和接头,RNA 聚合酶可以添加核糖核苷酸,核糖核酸酶可以去除核糖核苷酸。 

逆转录酶是能够聚合与原始 RNA 模板互补的 DNA 链 (cDNA) 的酶。RNA 易被 RNase 降解,使用逆转录酶生产 cDNA 能够克服使用 mRNA 时面临的问题。cDNA 成为 RNA 研究(例如基因表达分析)的各种下游应用中的稳定模板。可以使用常规 PCR、qPCR、一步式 RT-qPCR 或等温方法进行 cDNA 模板的扩增。扩增后,可以使用常规酶方案进行克隆,或利用 T4 DNA 聚合酶的 3’→5’ 核酸外切酶活性进行不依赖于连接反应的克隆。 

所有逆转录酶(RNA 依赖性 DNA 聚合酶)均可用于:

    RNase H (+/-)
专业应用
P7600L
EnzScript
即将推出  - 用于长 cDNA 和具有高百分比全长 cDNA 的文库;
需要模板切换的应用,即 RNA Seq
P7720L
StableScript
即将推出

-

用于长 cDNA;提高了持续合成能力、抑制剂抗性和热稳定性
(最佳温度 55°C)

205111
Omniscript Kit

 + 微阵列标记;特别设计用于使用任何数量的 RNA
进行逆转录;优化的缓冲液;无需 RNase H 步骤

RNA 聚合酶,或更具体地说是 DNA 导向的 RNA 聚合酶,是利用 DNA 模板合成 RNA 的酶。Poly(A) 聚合酶使用单链 RNA 作为引物,通过催化腺嘌呤残基掺入 RNA 的 3’ 末端,将 poly(A) 尾部添加到 RNA 中。 

T4 RNA 连接酶在 RNA 分析中特别有用,尤其是高通量 RNA 测序和微阵列分析等上游程序。T4 RNA 连接酶 1 和 2 能够通过连接相邻的 3'-OH 和 5'-PO4 多核苷酸来标记、环化或执行 RNA 分子间连接。使用 T4 RNA 连接酶 1 将接头连接至 RNA 3’ 端是通过 RT-PCR 和高通量测序进行 RNA 定量和发现的第一步。

    作用 应用
P7180L
T7 RNA Polymerase
即将推出  以 5’→ 3’ 方向从 DNA 模板合成 RNA;
对 T7 启动子具有特异性
  • 体外 mRNA 合成
  • RNA 探针标记
  • RNA 研究的 RNA 生成
  • 通过反义 RNA 进行表达控制
  • sgRNA 合成
P7460L
Poly(A) Polymerase
即将推出

催化 AMP 从 ATP 添加到 RNA 的 3’-OH,
以获得具有 poly(A) 尾部的 RNA

  • 使用 ATP 或虫草素对 RNA 进行 3' 标记
  • 对 RNA 添加 Poly(A) 尾部
  • Poly(A) 尾部增强转移到真核细胞中
    的 RNA 的翻译
 L6050L
T4 RNA Ligase 1
即将推出 单链 RNA 连接酶;也连接单链 DNA
分子
  • 单链 RNA 或 DNA 的连接
  • 单链 RNA 或 DNA 的 3'-末端标记
L6080L
T4 RNA Ligase 2
 
即将推出 连接 dsRNA 中的缺口;将 RNA 的 3’-OH 连接到
双链杂合体中的 DNA 的 5’-PO4
  • 多个寡核苷酸的模板连接
  • 含有特定位点修饰或标记的
    RNA 的合成
  • dsRNA 的缺口连接
  • 连接 DNA/RNA 双链体中 RNA 的 3’-OH 与 DNA
    的 5’-PO4

L6070L
T4 RNA Ligase 2
(Truncated) 

即将推出 催化预腺苷酸化 5’ 磷酸(DNA 或 RNA)
与 RNA 的 3’ 羟基之间的
磷酸二酯酶键形成
  • 通过连接头将预腺苷酸化 5’ DNA
    连接至 3’ 羟基 RNA
  • 小 RNA 克隆和测序

核糖核酸酶保护实验 (RPA) 是一种使用 RNase A 测定相对或绝对转录物丰度以及绘制 mRNA 末端和内含子/外显子边界的技术。

单碱基置换可以通过一种涉及对 RNA:DNA 异源双链中的单碱基错配进行 RNase A 剪切的简单酶方法进行检测和定位。

    作用 应用
19101
RNase A
   在 C 和 U 残基处降解 ssRNA 的核糖核酸内切酶*
  • 测定相对或绝对转录物丰度
  • 绘制 mRNA 末端和内含子/外显子边界 (RPA)
  • 绘制 DNA 或 RNA 中的单碱基突变
  • 去除质粒和基因组 DNA 制剂中的 RNA
  • 去除重组蛋白制剂中的 RNA
Y9220L
RNase H
即将推出 用于水解与 DNA 杂交的 RNA 的磷酸二酯键的
核糖核酸内切酶
RNase H 活性可降解 DNA:RNA 复合体的 RNA
模板,从而释放单链 cDNA 作为合成第二链
cDNA 的模板
Y9240L
RNase Inhibitor
即将推出 RNase A、B、C 的猪源性非竞争性抑制剂;
不抑制 RNase H 活性。
保护 RNA 不被降解;通常用作 RNA 酶法
操纵的预防措施
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