QIAGEN Fast Cycling PCR Kit
用于超快速和特异性PCR,适合各种PCR仪
用于超快速和特异性PCR,适合各种PCR仪
QIAGEN Fast Cycling PCR Kit以混合液规格提供,包含在每个循环仪上进行快速特异性扩增需要的所有组分(参见下表)。可有效扩增长达3.5 kb的基因组DNA和cDNA的PCR产物,包含复杂的模板。HotStarTaq Plus DNA Polymerase确保了高度特异性。使用新型的专利PCR缓冲液制定方案可显著节省时间高达75%,有效降低了形成聚合酶、引物和复杂模板。这能够让聚合酶在PCR退火阶段延伸引物,因此能有效缩短每个PCR循环中的退火过程。PCR循环时间可从超过1小时(35个循环)降低到少于20分钟(参见" Significant time savings")。快速升降温的PCR仪可将整个PCR时间控制在30分钟内(参见"Time savings of up to 75%"))。
试剂盒组分 | 特征 |
---|---|
HotStarTaq Plus DNA Polymerase | 高特异性产物(多达3.5 kb) 高特异性 室温设置 |
Fast Cycling PCR Buffer(包含Q-Bond Molecule) | 高速 需要最少的优化 |
CoralLoad Dye | 可立即用凝胶加载PCR产物 优化的可视移液器 |
Q-Solution | 方便扩增的高GC模板 |
QIAGEN Fast Cycling PCR Master Mix | 方便快速的反应设置 |
HotStarTaq Plus DNA Polymerase以混合液规格提供,确保了良好的热启动PCR性能。所提供的HotStarTaq Plus DNA Polymerase不具活性,在室温下没有聚合酶活性。因此可以防止较低温度时形成错配产物和引物二聚体(参见"Specific and reliable results"),同时使常温下PCR体系的构建更加方便。 HotStarTaq Plus DNA Polymerase在95°C下,由短时的5分钟诱导激活,可以较易地纳入到各种现有的PCR仪程序中。
新型的Fast Cycling PCR Buffer优化了特异性PCR产物的扩增,并显著地减少了循环时间。基于原始的QIAGEN PCR Buffer,这种新的制备方案在每个PCR循环的短时退火步骤中,确保了特异性-非特异性引物结合的高比率。由于KCl和(NH4)2SO4独特的平衡结合,相对于传统的PCR缓冲液,该PCR缓冲液提供严格的引物退火条件,具有更广泛的退火温度和Mg2+浓度。使用这种缓冲体系可在宽泛的温度范围和Mg2+浓度下获得特异性扩增,因此可有效减少PCR的优化。
创新的快速循环缓冲液包含新型的Q-Bond Molecule。这种分子可以极大地提高DNA聚合酶和单链DNA的结合能力,因此有助于将退火时间减少到仅需5秒(参见"Mechanism of fast cycling during annealing")。独特的缓冲体系配方和经优化的DNA聚合酶浓度都极大地降低了变性和延伸时间。Fast Cycling PCR Buffer被开发,从而无需对每个引物-模板体系进行优化,节省了时间和经费。使用这种缓冲体系可在宽泛的温度范围和Mg2+浓度下获得特异性扩增,而省去了耗时的优化过程。
QIAGEN Fast Cycling PCR Kit包含新型的CoralLoad Fast Cycling Dye。这种染料可以将PCR产物直接上样到琼脂糖凝胶中而无需加入凝胶上样缓冲液(参见"Ready-to-load PCR reactions")。CoralLoad Fast Cycling Dye包含2种染料:一种橙黄色染料和一种红色的染料,有助于估计DNA迁移距离并优化凝胶电泳时间。该染料提供了优化的移液器可视性并能直接方便地将PCR产物上样到凝胶上。
QIAGEN Fast Cycling PCR Kit还包含一种新型的PCR辅助剂Q-Solution,可通过改变DNA的熔解过程,来辅助困难模板的扩增。这种独特的试剂可以改善由于大量的二级结构或高GC含量的模版所导致的不理想扩增。与常用的其他PCR辅助剂,如DMSO不同,Q-Solution只有一个工作浓度,并且保证无毒和高纯度。
QIAGEN Fast Cycling PCR Kit为方便用户使用提供方便的混合液规格。HotStarTaq Plus DNA Polymerase在95°C下经5分钟诱导激活,此步骤可方便的纳入现有的热循环方案中。使用混合液的室温反应设置快速简易。将移液步骤最小化,减少了失误和污染的可能性,确保增加了通量和可重复性。该试剂盒包含用于快速简单PCR设置的精简优化实验方案。同样有该试剂盒提供的CoralLoad Dye增加了移液器的可视性,并确保可直接方便地将PCR产物上样到凝胶样上。
PCR循环时间可从超过1小时(35个循环)减少至少于20分钟(参见"Significant time savings"和下表"用于不同片段长度的PCR循环时间")。快速升温PCR仪可仅在30分钟内得到总PCR(参见Time savings of up to 75%")。The time savings afforded by the 由于QIAGEN Fast Cycling PCR Kit可节省时间,使其高度是用于通量增加的PCR反应,并且无需购买额外的昂贵实验设备。
QIAGEN Fast Cycling PCR Kit通过使用现有的实验设备增加PCR通量。该试剂盒可用于各种PCR仪,包括无特异性缺失的快速升温PCR仪(参见"Time savings of up to 75% ")。此外,不同于其他PCR试剂,使用该试剂无需调整或改变引物或退火温度。每个试剂盒组分经精心设计以提供方便可靠的快速OCR(参见" Easy and convenient procedure"和下表)。
片段长度(bp) | QIAGEN Fast Cycling操作流程(min) | 标准循环操作流程(min) | 节省时间(%) |
---|---|---|---|
200 | 15 | 68 | 78 |
500 | 20 | 68 | 71 |
1000 | 29 | 85 | 66 |
3000 | 63 | 155 | 59 |
QIAGEN Fast Cycling PCR Kit可用于各种PCR仪,能够增加PCR通量,并适用于高灵敏度和高特异性的PCR和常规PCR,以及以复杂基因组DNA和cDNA作为模板的PCR。该试剂盒高度适用于标准和快速PCR仪。
Features | Specifications |
---|---|
Real-time or endpoint | Endpoint |
ApplicationsZH | PCR, RT-PCR, Complex genomic templates, very low copy targets |
Sample/target type | Genomic DNA and cDNA |
With/without hotstart | With hotstart |
Reaction type | PCR amplification |
Mastermix | Yes |
Single or multiplex | Single |
Enzyme activity | 5' -> 3' exonuclease activity |