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RT² PreAMP技术利用多重、串联PCR对基因特异性cDNA进行最小偏向性的预扩增。RT² PreAMP cDNA Synthesis Kit可从1–100 ng总RNA中预扩增cDNA。
标准逆转录后,在使用RT² Profiler PCR Array进行基因表达分析前,可使用RT2 PreAMP Pathway Primer Mix从cDNA中预扩增芯片特异性靶标。每个RNA样本可产生足够多的cDNA,可用于至多4个不同RT² Profiler PCR Arrays的基因表达分析。
操作流程包括2个简单的步骤:
预扩增通路特异性基因的cDNA:从1–100 ng总RNA中合成的每个cDNA,都可用至多4组不同的PCR芯片特异性引物混合物进行扩增,用于至多4个不同RT² Profiler PCR Arrays的基因表达分析。试剂盒中的Side Reaction Reducer可去除预扩增时残留的引物,保证PCR芯片的准确检测。
为完成PCR芯片分析,预扩增的模板需与仪器专用的即用型RT² SYBR® Green qPCR Mastermix混合。
使用RT² PreAMP cDNA Synthesis Kit和RT² PreAMP Pathway Primer Mixes获得的cDNA模板可直接用于RT² Profiler PCR Arrays基因表达谱分析。