MGMT Pyro Kit
用于定量检测人类MGMT基因的甲基化
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特点
- 定量检测甲基化
- 实时获得全面结果
- 便利的解读复杂的序列信息
- 序列信息提供检测的内置参照
- 灵活的后续分析
产品详情
MGMT Pyro Kit用于定量检测人类MGMT基因外显子1的4个CpG位点的甲基化。该试剂盒包含扩增该基因所需的引物和试剂，以及在PyroMark Q24上使用焦磷酸测序技术实时定量检测甲基化所需的缓冲液、引物和试剂。
原理
MGMT Pyro Kit用于检测人MGMT基因（10号染色体上从131、265、519到131、265、537：CGACGCCCGCAGGTCCTCG的基因序列）外显子1的4个CpG位点的甲基化，在PyroMark Q24 System上使用焦磷酸测序技术实时定量检测甲基化。MGMT（O（6）-甲基鸟嘌呤-DNA 甲基转移酶）基因编码用于修复烷基化DNA的酶，该酶通过去除鸟嘌呤O6的甲基来修复烷基化DNA。MGMT基因甲基化增加会抑制该基因的表达，降低DNA的修复功能。在多数癌症中，包括脑癌、结肠癌、肺癌和乳腺癌，有25–50%的MGMT基因发生甲基化。
程序
运用PCR技术对亚硫酸盐转化的基因组DNA进行扩增，测定特定区域的核酸序列（参见" Illustration of MGMT assay"）。使用该法进行定量和定性分析时，特定区域周围的核酸序列峰被视为标准峰和参照峰。
使用针对外显子1的引物对片段PCR扩增后，将扩增子固定在高性能链霉素亲和琼脂糖上。将单链DNA和相应序列的引物退火处理得到DNA。然后在PyroMark Q24 System上对样品进行分析（参见" Unmethylated DNA from a human glioblastoma sample"，" Methylated DNA from a human glioblastoma sample"和" Highly methylated control DNA"）。
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应用
MGMT Pyro Kit用于定量检测人类MGMT基因（10号染色体上从131、265、519到131、265、537：CGACGCCCGCAGGTCCTCG的基因序列）外显子1的4个CpG位点的甲基化。
辅助数据和图表
Unmethylated DNA from a human glioblastoma sample.
Unmethylated DNA from a human glioblastoma sample.
资源
安全数据表 (1)
试剂盒操作手册 (1)
Certificates of Analysis (1)
FAQ
Can PyroMark Gold reagents be vortexed?