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PCR

miRNA 定量

深刻且细致地了解任何 miRNA

定量 PCR 是分析已知 miRNA 靶标的首选工具,与 NGS 相比具有多种优势。qPCR 具有快速、简单且成本低廉的特点,可对少量的 RNA 样本进行极其灵敏的分析。它也很容易从筛选和表达谱分析扩展到 NGS 研究的验证以及功能研究结果的确认。

但是,miRNA qPCR 仍面临一些特殊的挑战。它们的丰度低、序列短、GC 含量变化大且具有高度同源的家族,这些问题使得难以设计出非常特异的引物和探针。我们设计出 miRCURY LNA miRNA PCR 和 Probe PCR 系统来克服这些问题,即便是针对要求最苛刻的应用,您也能够进行稳健且高度灵敏的 miRNA 表达谱分析。

如何从中受益

Analyze any miRNA biomarker with ease

轻松分析任何 miRNA 生物标志物

miRNA 十分有望成为多种疾病和生物学过程的生物标志物,例如癌症、心脏病、神经系统功能、凝血、DNA 修复等。

我们提供的预设计 miRNA PCR assay 是市场上最全面的产品组合,因此您可以轻松找到对您感兴趣的靶标进行研究所需的 assay。我们的每套产品组合都包括针对 271 个不同物种的 31,000 多种独特 assay,并且可以全面覆盖 miRBase 22 中的靶标。

您在研究新型 miRNA 还是小 RNA?如果没有预设计 assay 可用,请使用我们方便的在线定制工具订购定制 assay。

Study the relevant targets for relevant results

研究相关靶标以获得相关结果

我们的预设计 focus panel 涵盖了多个物种,为筛选生物学相关的 miRNA 提供了一种快速且方便的方法。每款 panel 所含的靶标都是综合根据文献检索、NGS 和其他研究以及领先专家的建议精心挑选的。

血清/血浆 focus panel 是根据我们对血液、血清和血浆样本中 miRNA 表达的广泛分析,并基于现有的有限数量同行评审发表论文而精心开发的。使用来自健康和患病个体的血清/血浆样本中超过 100 万个内部和协作数据点(包括来自不同阶段各种癌症、神经系统疾病、神经退行性疾病、过敏、炎症等的 miRNA 表达数据)进行相关 miRNA 的挑选。

所有 panel 均可通过 GeneGlobe 轻松在线订购。

qPCR

针对任何 miRNA 靶标的优化设计 assay

较短的序列长度和高度的相似性使 miRNA assay 设计变得复杂。我们通过利用锁核酸 (locked nucleic acid, LNA) 对 assay 进行优化来克服这一困难。

LNA 碱基增加了引物结合亲和力,使我们能够设计出非常短的引物和探针,它们可以直接放置在 miRNA 靶标上,以产生两个不重叠的 miRNA 特异性退火点。采用标准寡核苷酸时,这一点无论如何是无法做到的。结果得到了最佳的 assay 设计,可准确检测您感兴趣的 miRNA,其特异性甚至能够区分单核苷酸差异。

此外,LNA 使引物 Tm 均一化成为可能,使得所有引物都具有最佳的 Tm,从而实现均一的扩增。这使您能够同时检测具有不同 GC 含量的高丰度和低丰度靶标。

Quantify low-abundance miRNAs without preamplification

无需预扩增即可定量低丰度 miRNA

采用 qPCR 对低丰度 miRNA 进行定量通常需要进行预扩增,但 miRCURY LNA miRNA PCR 系统可在免去该步骤的情况下也能获得准确的结果。

秘密是什么?LNA 增强技术。LNA 寡核苷酸增加的结合亲和力使我们能够设计出在无需预扩增的情况下就能够以最高特异性和灵敏度检测任何生物学相关 miRNA 的 assay。

您的检测试剂选择

您可以在基于 SYBR Green 和基于水解探针的 miRNA 检测系统之间进行选择,两者都可提供高灵敏度和特异性的检测。

哪种检测试剂适合于您?
在成本、易用性、特异性、稳健性、设计灵活性和多重检测能力方面,每种方法都具有独特的优势。

工作流程简单快速

miRCURY LNA miRNA PCR 系统既具有通用型逆转录 (reverse transcription, RT) 反应的速度和便利性,又具有 LNA 增强型 qPCR 引物带来的灵敏度和特异性。简单的工作流程能够为所有样本类型提供快速且准确的结果,包括组织、细胞、外泌体和液体活检样本。

实验的开始需要什么

通用型逆转录试剂盒 (1) 包含可同时用于 SYBR Green 和探针法检测的试剂。每套系统专用的 PCR 预混液 (3) 与您所选择的预设计或定制 assay 或 panel (4) 配套使用。可选的 RNA Spike-In Kit (2) 可以让您对 RNA 分离、cDNA 合成和 PCR 扩增步骤进行质控,以便尽早识别出质量较差的样本,将其从研究中剔除,并节省时间和试剂。

  检测系统 SYBR Green LNA 增强型水解探针
1 逆转录 miRCURY LNA RT Kit miRCURY LNA RT Kit
2 可选外参 RNA Spike-In Kit, For RT RNA Spike-In Kit, For RT
3 qPCR 预混液 miRCURY LNA SYBR Green PCR Kits miRCURY LNA Probe PCR Kits
4 assay 或 panel miRCURY LNA miRNA PCR Assays
• miRCURY LNA miRNA Custom PCR Assays
• miRCURY LNA miRNA Focus PCR Panels
• miRCURY LNA miRNA Custom PCR Panels
• miRCURY LNA miRNA miRNome PCR Panels

• miRCURY LNA miRNA Probe PCR Assays
• miRCURY LNA miRNA Custom Probe PCR Assays

即将推出:
• miRCURY LNA miRNA Focus Probe PCR Panels
• miRCURY LNA miRNA Custom Probe PCR Panels
• miRCURY LNA miRNA miRNome Probe PCR Panels

哪种 assay 或 panel 最适合于您的研究?

miRCURY LNA miRNA PCR 系统使您可以利用单独的 assay 或完全灵活的定制 panel 针对各种类型的研究对实验设置进行量身定制。您可以使用相同的 cDNA 反应,并在单个引物、预设计 miRNome 和 Focus panel 或定制 panel 之间无缝切换。

产品类型 优势 研究类型
Starter kit* 使用少量样本进行少数 assay 实验入门
单个 assay 对少数 miRNA 进行小规模筛选或对大量样本
进行定量的经济选择
使用少量 miRNA 进行验证实验
(试点/初步实验)
定制 panel 预先移液、定制选择的 assay 确保高度可重复性 重点筛选或验证实验
Focus panel 针对特定研究领域的预定义 assay 选择 重点筛选
miRNome panel 涵盖所有重要 miRNA 全基因组筛选

产品

深入了解网络研讨会和其他资源

Get great results, even from difficult sample types

即使从困难的样本类型中也能获得良好的结果

血清/血浆、尿液和外泌体等液体活检样本中的游离 miRNA 作为疾病生物标志物具有广泛的潜力。然而,这些样本的 RNA 含量很低而抑制剂水平较高,并且对许多预分析变量很敏感,这使得 miRNA 表达谱分析成为一个挑战。

我们的生物体液 miRNA 指南为生物体液样本中的生物标志物发现和验证提供了专家信息和建议。了解优化的样本处理和制备、质量控制方法和 miRNA 检测技术,以确保生物体液 miRNA 表达谱分析获得成功。

miRCURY LNA 在 miRQC 研究中表现最佳

在迄今为止规模最大的 miRNA 基准研究中,Pieter-Mestdagh 及其同事比较了各种商用 miRNA 表达谱分析平台在关键领域的性能。miRCURY LNA 平台是唯一在所有领域中表现上佳的平台,兼具高灵敏度和特异性。点击此处浏览论文。

miRCURY LNA performs best in miRQC study
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