NRAS Pyro Kit
基于序列定量分析NRAS基因的突变
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NRAS Pyro Kit (24)
Cat. No. / ID: 970530
For 24 reactions: Sequencing Primers, PCR Primers, Unmethylated Control DNA, PyroMark PCR Master Mix, CoralLoad Concentrate, Buffers, and Reagents
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NRAS Pyro Kit 旨在用于分子生物学应用。该产品不能用于疾病诊断、预防和治疗。
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特点
- 实时获得多个结果
- 准确定量NRAS基因中的突变
- 简便检测复杂突变
- 序列信息提供检测的内置参照
- 灵活的后续分析
产品详情
NRAS Pyro Kit是用于鉴定NRAS基因突变的分子检测试剂盒。该试剂盒包含扩增NRAS基因所需的引物和试剂、外加缓冲液、引物和试剂，在PyroMark Q24 System上使用焦磷酸测序技术实时定量检测突变。
原理
NRAS Pyro Kit用于实时定量检测人NRAS基因编码子12、13和61的突变，在PyroMark Q24 System上使用焦磷酸测序技术检测。NRAS基因编码一种GTPase，该GTPase是成神经细胞瘤RAS病毒（v-ras）原癌基因同源物。在所有恶性黑素瘤中，有将近13–25%发生NRAS突变，通常是编码子12、13和61的突变。这些突变影响NRAS信号通路的活性。
可检测以下种类的突变：
- 编码子12/13：G12A、G12C、G12D、G12R、G12S、G12V、G13A、G13C、G13D、G13R、G13S和G13V
- 编码子61：Q61E、Q61H、Q61K、Q61L、Q61P和Q61R
程序
该试剂盒包含2部分实验：一个用于检测编码子12和13的突变；另一个用于检测编码子61的突变（参见" Illustration of the NRAS assay"和" Pyrogram trace of a normal genotype in codon 12–13"）。运用PCR技术对这两个片段分别进行扩增，测定特定区域的核酸序列。使用该法进行定量和定性分析时，特定区域周围的核酸序列峰被视为标准峰和参照峰。
使用针对编码子12/13和编码子61的引物对两个片段PCR扩增后，将扩增子固定在高性能链霉素亲和琼脂糖上。将单链DNA和相应序列的引物退火处理得到DNA。然后在PyroMark Q24 System上设置程序和运行程序对样品进行分析。运行后可以通过调节"Sequence to Analyze"来检测稀有突变（参见" Pyrogram trace of a GGT to AGT mutation in base 1 of codon 12"和" Pyrogram trace of the reanalysis of the sample in the previous figure"）。
查看图表
应用
NRAS Pyro Kit用于检测人NRAS基因编码子12、13和61的突变。该试剂盒确保准确的定量突变分析，适用于各种研究领域，包括癌症和表观遗传学研究。
可检测以下种类的突变：
- 编码子12/13：G12A、G12C、G12D、G12R、G12S、G12V、G13A、G13C、G13D、G13R、G13S和G13V
- 编码子61：Q61E、Q61H、Q61K、Q61L、Q61P和Q61R
辅助数据和图表
Pyrogram trace of a normal genotype in codon 12-13.
Pyrogram trace of a normal genotype in codon 12-13.
资源
试剂盒操作手册 (7)
安全数据表 (1)
分析软件 (1)
Certificates of Analysis (1)
FAQ
Can I use more than 10ng DNA for the PCR reaction for the Pyro kits?
Which purification kits are recommended for the Pyro kits?
What plug-ins are available for the Pyrosequencing kits?
Can PyroMark Gold reagents be vortexed?