RNeasy Lipid Tissue Mini Kit
从富含脂肪的组织和其他类型组织中纯化至多100 µg的总RNA
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特点
- 优化的裂解条件，用于富含脂肪的组织和其他组织
- 高产量总RNA，无苯酚污染
- 获得高品质RNA，适合多种下游应用
产品详情
RNeasy Lipid Tissue Mini Kit包含QIAzol Lysis Reagent和RNeasy离心柱，前者用于裂解脂肪和其他类型组织样本，后者用于纯化至多100 µg高品质RNA。该试剂盒可在QIAcube全自动核酸纯化仪上全自动化完成。使用RNAlater RNA Stabilization Reagent（仅适用非脂肪组织）或Allprotect Tissue Reagent可方便的稳定组织样本，使用TissueRuptor或TissueLyser体系可有效地破碎样本。处理更大的样本可使用RNeasy Lipid Tissue Midi Kit（离心柱的结合能力为1 mg RNA）。
绩效
RNeasy Lipid Tissue操作流程将QIAzol裂解方法与RNeasy RNA分离方法结合，能从富含脂肪的组织中得到高产量总RNA，10 mg脑组织RNA的平均产量为10 µg、10 mg动物脂肪组织RNA的平均产量为2.4 µg。RNeasy Lipid Tissue Kits可有效的纯化高品质总RNA，无苯酚残留（参见"High-quality RNA" 和 "High yields of RNA without phenol carryover"）。从从脂肪组织得到的RNA适用于包括real-time RT-PCR（参见"Real-time analysis" ）等下游应用。
原理
RNeasy Lipid Tissue Kits适用于富含脂肪的组织，如脑和脂肪组织。方便RNeasy Lipid Tissue实验方案结合了优化的苯酚/胍的裂解方法以及经验证的RNeasy硅胶膜纯化方法，能纯化得到高品质的总RNA。QIAzol Lysis Reagent结合了有机提取与离液破碎的方法，具有很高的裂解效率。RNeasy技术适用于大于200 nt RNA，因此RNA产物不包括5S rRNA、tRNA或其他小分子量RNAs，产物占细胞内总RNA的15–20%。
程序
10–100 mg组织样本在QIAzol Lysis Reagent中均质化。加入氯仿，匀浆离心后分为水相和有机相。吸取上层水相后加入乙醇以提供合适的结合条件。然后将样品加入RNeasy离心柱，至多100 µg的总RNA与硅胶膜结合，苯酚和其他污染物被高效洗去。使用30–100 µl不含RNase的纯水即可洗脱得到高品质RNA（参见"RNeasy Lipid Tissue Mini procedure）。
应用
RNeasy Lipid Tissue Kits可简单有效的纯化高品质RNA，得到的RNA适用于多种下游应用，包括芯片分析和real-time RT-PCR。
辅助数据和图表
High yields of RNA without phenol carryover.
RNA was isolated from 10 mg rat brain tissue using the RNeasy Lipid Tissue Mini Kit (RNeasy Lipid), a standard silica-gel-membrane procedure (Std. silica), or a phenol/guanidine-based reagent (PhOH/Gdn), following supplier's instruction. [A] Formaldehyde agarose gel analysis shows high yields of RNA using the RNeasy Lipid Tissue Mini Kit. Using the RNeasy and other silica-based methods, small RNAs (such as 5.8S rRNA, 5S rRNA, and tRNAs) are selectively excluded. [B] Absorbance spectrum shows contaminants and phenol when using the phenol/guanidine-based reagent.
规格
| 特点 | 规格 |
|---|---|
| Sample amount | 10–100 mg |
| Yield | 2.4–10 mg |
| Technology | Silica technology |
| Processing | Manual |
| Purification of total RNA, miRNA, poly A+ mRNA, DNA or protein | RNA |
| Elution volume | 30–100 µl |
| Main sample type | Fatty tissue samples |
| Time per run or per prep | 45 minutes |
| Format | Spin column |
资源
安全数据表 (1)
产品介绍与指南 (1)
用户开发的实验方案 (4)
试剂盒操作手册 (1)
快速启动实验方案 (1)
基因表达分析 (1)
Certificates of Analysis (1)
文献
Lipopolysaccharide activates an innate immune system response in human adipose tissue in obesity and type 2 diabetes.
Am J Physiol Endocrinol Metab; 2006; 292 (3):E740-7 2006 Nov 7 PMID:17090751
Chronic ethanol feeding to rats decreases adiponectin secretion by subcutaneous adipocytes.
Am J Physiol Endocrinol Metab; 2006; 292 (2):E621-8 2006 Oct 17 PMID:17047161
Targeting an E2F site in the mouse genome prevents promoter silencing in quiescent and post-mitotic cells.
Oncogene; 2006; 26 (19):2727-35 2006 Oct 30 PMID:17072340
Paternally biased X inactivation in mouse neonatal brain.
Genome Biol; 2010; 11 (7):R79 2010 Jul 27 PMID:20663224
A study of alternative splicing in the pig.
BMC Res Notes; 2010; 3 :123 2010 May 5 PMID:20444244