Estos buenos limpiadores pulen, cortan y recortan
Los reactivos y reactantes que se quedan atrás pueden obstaculizar los procesos posteriores. Utilice la preparación enzimática adecuada para limpiar sus muestras antes de comenzar el siguiente paso. Acelere y mejore la amplificación y la transcripción con algunos aditivos no tan secretos.
Enzimas para escisión y limpieza de reactivos residuales
La limpieza enzimática de muestras de ADN con Exonuclease I, DNase I, RNase A y proteasas elimina los cebadores, nucleótidos y enzimas residuales antes del análisis de SNP, la secuenciación de próxima generación, la secuenciación de ADN Sanger u otros análisis anterógrados.
La enzima TAGZyme DAPase y el sistema TAGZyme se utilizan para la eliminación de la etiqueta His de proteínas que contienen un punto de parada intrínseco DAPase (expresado utilizando el vector TAGZyme pQE-2) o de proteínas que contienen un punto de parada de glutamina diseñado.
Enzima | Actividad | Aplicación | |
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X8010L Exonuclease I |
Próximamente | La exonucleasa I escinde el ADN monocatenario en la dirección 3’→5’, liberando los mono/dinucleótidos de 5’ y dejando intactas las moléculas de ADN bicatenario y el extremo 5’; la digestión se inhibe por la presencia de un fosfato de extremo 3’. |
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79254 RNase-free DNase (1500 unidades Kunitz) |
Endonucleasa que corta inespecíficamente el ADN para liberar productos di-, tri- y oligonucleótidos con 5’ extremos fosforilados y 3’ hidroxilados; actúa sobre ADNmc y ADNbc, cromatina e híbridos ARN:ADN |
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19101 RNase A |
Endorribonucleasa que degrada el ARNmc en residuos C y U |
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19131 Proteinase K |
QIAGEN Proteinase K es una proteasa de tipo subtilisina aislada del hongo saprofito Tritirachium album |
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19155 Protease |
QIAGEN Protease es una proteasa de serina aislada de una cepa recombinante de Bacillus; una alternativa económica a Proteinase K |
Digestión con proteasas en el aislamiento de ADN y ARN nativos de diversas fuentes |
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34362 TAGzyme DAPase Enyzme |
TAGZyme DAPase (dipeptidil peptidasa I recombinante) |
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Mejora de los rendimientos
El uso de proteínas de unión al ADN en las reacciones de amplificación y secuenciación puede mejorar el rendimiento y la calidad de esas moldes. La proteína de unión al ADN, proteína del gen 32 del bacteriófago T4 (T4gp32), aumenta la eficacia de la amplificación por PCR con una serie de moldes diversos. Además, el uso de la proteína de unión al ADN monocatenario (single-stranded DNA-binding, SSB) de E. coli en las reacciones de secuenciación del ADN aumenta la resolución de las series de secuenciación.
El tratamiento con pirofosfatasa inorgánica, componente esencial de las reacciones de preparación del ARN, permite aumentar la tasa de transcripción in vitro. Esta enzima escinde el pirofosfato en dos moléculas de fosfato e impide que el pirofosfato precipite con el magnesio.
Reactivo | Actividad | Aplicación | |
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Y9030L E. coli ssDNA Binding Protein |
Próximamente | Se une con gran especificidad al ADN monocatenario; termoestable |
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Y9130L T4 Gene 32 Protein |
Próximamente |
Estabiliza las regiones de ADN de cadena sencilla |
Aumenta la procesividad de algunas ADN polimerasas |
Y9380L E. coli pyrophosphatase |
Próximamente |
Pirofosfatasa inorgánica que cataliza la hidrólisis del pirofosfato inorgánico para formar ortofosfato*.
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Y9370L Thermostable pyrophosphatase |
Próximamente |
La pirofosfatasa termoestable es una enzima recombinante de Sulfolobus acidocaldarius que cataliza la hidrólisis del pirofosfato inorgánico para producir ortofosfato† |
Útil para potenciar la replicación del ADN en la PCR |
Escisión de hebras mediada por UDG
La escisión de hebras mediada por UDG (Uracil ADN glicosilasa en inglés) es una herramienta importante en biotecnología molecular, que permite la escisión controlada y de localización específica de ADN monocatenario o bicatenario sintetizado química o enzimáticamente con incorporaciones únicas o múltiples de desoxiuridina.
Enzima | Actividad | Aplicación | |
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19160, G5010L |
Próximamente |
La glicosilasa de ADN de uracilo (UDG) interviene en la reparación por escisión de bases; la UDG crea puntos abásicos en el ADN que contiene uracilo; degrada el ADN que contiene uracilo. |
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Y9180L 10X Uracil Cleavage System |
Próximamente |
El sistema consta de dos componentes enzimáticos, Uracil DNA Glycosylase y Endonuclease VIII. Cuando las enzimas se añaden secuencialmente a una reacción en la que un fragmento de ADN sintético contiene un desoxiuracilo, se genera un hueco de un solo nucleótido en la ubicación del residuo de uracilo |
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Y9080L Endonuclease VIII |
Próximamente |
Endonuclease VIII funciona a la vez como N-glicosilasa (eliminando las lesiones oxidativas de la base) y como AP-liasa (eliminando posteriormente el grupo fosfodiéster), dejando fosfatos terminales en los extremos 5’ y 3’; participa en la reparación por escisión de bases de los daños oxidativos del ADN |
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Preguntas frecuentes sobre la reducción de artefactos y la limpieza de reacciones
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