Thérapie génique

Thérapie génique avec PCR numérique
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créer des thérapies sûres et efficaces

La thérapie génique est susceptible de faire progresser considérablement le traitement des troubles monogéniques, et peut-être même d’aboutir à des remèdes, grâce au transfert de matériel génétique dans les cellules appropriées de l’organisme. La thérapie génique peut être mise en œuvre à l’aide de plasmides, mais elle est souvent réalisée par transfert de gènes à l’aide d’un virus adéno-associé (VAA) ou d’un lentivirus.

Les vecteurs VAA sont souvent privilégiés en raison de leur taille réduite (~5 kb), utile pour délivrer de petits gènes. En outre, ce sont des vecteurs non intégratifs, par conséquent ils présentent une toxicité systémique relativement faible et ne peuvent se propager sans un virus assistant, ce qui les rend sûrs pour un usage clinique.

Procédure de la thérapie génique

Essayez un instrument de PCR numérique

Vous voulez en savoir plus sur nos solutions de PCR numérique répondant à vos besoins de thérapie cellulaire et génique ? Complétez le formulaire pour demander une démonstration de nos instruments de PCR numérique.

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Quantification du titre viral VAA

Une quantification et une caractérisation de précision des VAA sont essentielles pour le dosage précis du patient. La qPCR est une méthode largement utilisée pour la quantification du titre des VAA. Mais cette technique est limitée par la présence d’inhibiteurs de PCR susceptibles d’entraver l’amplification et d’introduire une variabilité, sans compter qu’elle demande une courbe d’étalonnage.

À l’inverse, la PCR numérique affiche une efficacité d’amplification accrue et une tolérance aux inhibiteurs supérieure à la qPCR compte tenu du fractionnement et de la mesure en point final, et ne nécessite pas de courbe d’étalonnage.

Nous avons mis au point une nouvelle procédure de quantification du génome du vecteur viral, de la lyse de la capside à la détermination du titre, avec des dosages simples et multiples pour quantifier et qualifier les VAA à l’aide du QIAcuity Digital PCR System.

Accéder à des services de conception de dosages par PCR numérique personnalisés

Nous nous sommes associés à Niba Labs pour le développement de nouveaux dosages simplex ou multiplex personnalisés destinés à la quantification des acides nucléiques et à l’optimisation des dosages qPCR existants en vue de leur utilisation dans le cadre de la PCR numérique. Niba Labs évaluera la performance des dosages et les validera dans le cadre des bonnes pratiques de fabrication (BPF).

La combinaison de nos produits et services permet à QIAGEN et Niba Labs de vous aider à surmonter les contraintes potentielles en matière de ressources et à respecter les délais des projets exigeants.

Une approche moderne

Il est possible d’accélérer la fabrication d’une thérapie génique avec une méthode de dPCR sur plaques évolutive et rapide.

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Ressources relatives aux applications de thérapie génique

La PCR digitale pour le titrage des VAA

Comment améliorer la précision et la variabilité des mesures du titre des VAA ? Découvrez la dPCR pour le titrage des VAA grâce à Stuart Nelson, technicien expert chez Eli Lilly.

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Absolu, précis, vérifié

Simplifier la quantification des VAA pour appuyer la prochaine génération de thérapies géniques – une procédure complète avec le kit de lyse des vecteurs viraux CGT.

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Titrage des VAA en seulement 2 heures

Découvrez les raisons pour lesquelles le Center for Breakthrough Medicine recommande le QIAcuity Digital PCR System comme méthode de choix pour le titrage des VAA.

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Une procédure standardisée pour la quantification du génome du vecteur viral

Les procédures par PCR quantitative sont pratiques, mais engendrent d’importantes variabilités. Découvrez comment des kits spécifiques de lyse de la capside et des dosages par PCR numérique peuvent rendre le titrage du génome du vecteur précis, reproductible et rapide.

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Un titrage viral à haut débit pour les VAA

Découvrez comment le Center for Breakthrough Medicines (CBM) utilise la dPCR QIAcuity pour obtenir des titres précis avec des dosages multiples d’échantillons difficiles.

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Une méthode de dPCR pour le titre du génome des VAAr

Regardez le Dr A’Drian Pineda et le Dr Huiwen Liu, une scientifique chevronnée de Resilience, aborder la quantification du génome du vecteur des VAAr avec le QIAcuity Digital PCR System.

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Un protocole optimisé de titre du génome du vecteur des VAAr

Cette étude montre que le système de dPCR sur plaques QIAcuity offre la même précision que le système de ddPCR, mais avec des résultats obtenus plus rapidement, un débit et une évolutivité globalement plus importants.

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Une quantification reproductible des VAA

Ici nous testons la reproductibilité de la quantification et de la qualification d’échantillons de VAA avec un dosage double précis et évolutif sur l’instrument de dPCR QIAcuity, en ciblant à la fois un insert et la chaîne principale du virus.

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Vous aimeriez un pack personnalisé répondant aux besoins de votre entreprise ?

Nous savons bien qu’une solution unique n’est pas adaptée à toutes les situations. Nous proposons des produits, technologies et services destinés à la recherche sur la thérapie génique. Contactez-nous, nous définirons ensemble un pack sur mesure pour vous.

Découvrez nos produits destinés à la thérapie génique

Découvrez les produits proposés par QIAGEN pour la thérapie génique (2)

dna purification plasmid dna

EndoFree Plasmid Kits

For purification of up to 10 mg endotoxin-free advanced transfection-grade plasmid or cosmid DNA

dpcr assays kits and instruments dpcr kits

QIAcuity Residual DNA Quantification Kits

For checking carryover of host cell DNA with higher accuracy and precision using the QIAcuity Digital PCR System

Maîtriser la contamination

Un transfert d’ADN résiduel de cellule hôte (HCD) induit des risques importants de sécurité lors de la fabrication de traitements à base de protéines et de vaccins. Ces risques incluent l’oncogénicité, l’infectivité et l’immunogénicité imputables à votre thérapie cellulaire ou génique. Par conséquent, les taux de HCD ne doivent pas dépasser ceux définis par les organismes de réglementation tels que la Food and Drug Administration (FDA) et l’Organisation mondiale de la Santé (OMS).

Comparée à la qPCR, la PCR numérique permet une sensibilité accrue de détection avec un échantillon de moindre quantité, les applications sont ainsi plus fiables. Un dosage de cible multicopie garantit des résultats non affectés par le taux de fragmentation de l’ADN résiduel (ADNr), un vrai problème avec la qPCR.

En outre, l’ADN contaminant dans vos réactifs de PCR peut être une source importante de fond et de faux positifs. Une production ultra-propre améliore la spécificité et l’efficacité de la PCR numérique avec sondes, cela permet une analyse unique (singleplex), voire jusqu’à 5-plex, de précision. Des processus dédiés sont intégrés pour permettre une production ultra-propre du Master Mix, ce qui limite le fond d’ADN contaminant et le biais de GC et vous permet de vous fier totalement à vos réactifs de PCR. C’est le choix parfait pour des applications microbiennes sans contamination et des applications de contrôle qualité, comme les tests d’ADN résiduel.

Trouvez des produits pour les tests de contaminants

Trouvez des produits pour les tests de contaminants (2)

dpcr assays kits and instruments dpcr kits

QIAcuity Residual DNA Quantification Kits

For checking carryover of host cell DNA with higher accuracy and precision using the QIAcuity Digital PCR System

dpcr assays kits and instruments dpcr kits

QIAcuity UCP Probe PCR Kit

Kits from Ultra Clean Production for use with the QIAcuity digital PCR instruments

QDI, PKB, QDI Data Scientist, Caucasian female sitting in front of computer with two screens holding papers, in an office setting

Accélérez vos thérapies géniques grâce aux données

De l’analyse des données aux bases de données, de l’expression génique à l’assemblage du génome, de l’interprétation à l’intégration – QIAGEN Digital Insights présente les caractéristiques et qualités des outils de bio-informatique qu’il vous faut pour obtenir des informations pertinentes et faciliter des découvertes en matière de thérapie génique.

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