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Penta His HRP Conjugate Kit
Cat. No. / ID: 34460
125 μl de Penta His HRP Conjugate, 5 g de réactif bloquant, 50 ml de tampon de réactif bloquant (concentré 10x)
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Kit
Penta·His HRP
RGS·His HRP
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Features
- Détection hautement sensible et très rapide des protéines marquées à l’histidine, et des épitopes RGS·His
- Pas besoin d’anticorps secondaires
- Réactif bloquant optimisé fourni
Product Details
Les Anti·His HRP Conjugate Kits, notamment le RGS·His HRP Conjugate Kit (conjugués de marqueurs His-tag) et le Penta·His HRP Conjugate Kit (conjugués de marqueurs 6xHis-tag), sont destinés à la détection sensible des protéines recombinantes présentant des marqueurs His-tag, sans nécessité d’utiliser des anticorps secondaires. Ils contiennent des anticorps anti·His conjugués à de la peroxydase de raifort (PR). Dans les procédures de détection, l’anticorps anti·His se lie au marqueur His-tag d’une protéine puis le complexe est localisé à l’aide de substrats chimiluminescents ou chromogènes qui réagissent avec la PR.
Performance
| Caractéristique | RGS·His HRP Conjugate Kit | Penta·His HRP Conjugate Kit |
|---|---|---|
| Détection | Marqueur N-terminal, C-terminal et His-tag interne (contenant l’épitope RGSHHHH) | Marqueur N-terminal, C-terminal et 6xHis-tag interne |
| Sensibilité dans les transferts en point* | 10 pg | 10 pg |
| Sensibilité dans les transferts de western* | 50 pg | 50 pg |
| Isotype des anticorps | IgG1 de souris | IgG1 de souris |
| Réactivité croisée | Négligeable avec lysats cellulaires bruts d’E. coli, levure, mammifère ou insecte | Négligeable avec lysats cellulaires bruts d’E. coli, levure, mammifère ou insecte |
| Forme | Solution de réserve stabilisée | Solution de réserve stabilisée |
| Solution prête à l’emploi | 125–250 ml | 125–250 ml |
Principle
Les Anti·His HRP Conjugate Kits contiennent les QIAexpress Anti·His Antibodies chimiquement couplés à l’enzyme rapporteuse de la peroxydase de raifort (PR). Ils peuvent être utilisés pour la détection directe, hautement spécifique et sensible, de toute protéine recombinante présentant un marqueur His-tag accessible. Plus besoin d’utiliser des anticorps secondaires, vous gagnez du temps avec les procédures d’immunodétection. Les Anti·His HRP Conjugate Kits peuvent être utilisés avec des substrats de détection chimiluminescents ou chromogènes.
Procedure
Le Manuel de détection et de dosage QIAexpress, qui accompagne tous les produits de détection et dosage QIAexpress, contient des exemples détaillés de protocoles et des consignes pour la conception et la réalisation des dosages.
Applications
Les Anti·His HRP Conjugate Kits, notamment le RGS·His HRP Conjugate Kit (conjugué de marqueurs His-tag) et le Penta·His HRP Conjugate Kit (conjugué de marqueurs 6xHis-tag), reconnaissent les mêmes épitopes comme leur anticorps correspondant et peuvent être utilisés pour la détection directe chimiluminescente ou chromogène des protéines marquées à l’histidine pour :
- Procédures de transfert de western, en point et de colonies
- Procédures ELISA et autres procédures d’immunodosage
Comparaison du RGS·His HRP Conjugate Kit et du Penta·His HRP Conjugate Kit
| Caractéristiques | RGS·His HRP Conjugate Kit | Penta·His HRP Conjugate Kit |
|---|---|---|
| Enzyme conjuguée | PR | PR |
| Détection | Anticorps secondaires requis | Anticorps secondaires requis |
| Épitope détecté | RGSHHHH | HHHHH |
| Substrat pour détection par transfert | Biotech ECL | 4C1N |
| Substrats pour procédure de dosage | OPD | OPD |
| Marqueur | Marqueur His-tag | Marqueur His-tag |
Les Anti·His HRP Conjugate Kits sont destinés aux applications de biologie moléculaire. Ces produits ne sont pas conçus pour le diagnostic, la prévention ou le traitement d’une maladie.
Resources
Safety Data Sheets (3)
Quick-Start Protocols (1)
Kit Handbooks (1)
Supplementary Protocols (1)
Certificates of Analysis (1)
FAQ
What epitopes do the Anti-His Conjugates and Anti-His Antibodies recognize?
Which Anti-His Antibody is the most sensitive for my protein of interest?
Penta-His and Tetra-His Antibody bind to proteins that have 6xHis tags regardless of the surrounding amino-acids, even when the tag is partially hidden. Subtle differences in the antigen recognition sites of these antibodies mean that some 6xHis-tagged proteins are detected with higher sensitivity by one Anti-His Antibody than by the others (see figure below). Therefore, to achieve optimum results, we recommend comparison of these antibodies in parallel for new applications and proteins. QIAGEN offers the Anti-His Antibody Selector Kit for this purpose.
Sensitivity of QIAexpress Anti·His Antibodies
Note: RGS His Antibody regonizes the RGS(His)4 epitope that is found on proteins endcoded by most pQE vectors as well as several pRSETan pBlue BacHis -vectors from Invitrogen.
FAQ ID -172
How can I avoid poor immunolocalization morphology with Anti-His Antibodies?
Can the Blocking Reagent supplied with the Penta-His HRP Conjugate be used with other antibodies?