Cartouches Ni-NTA Superflow

• La purification en une étape la plus fiable dans des conditions très diverses
• Rendements importants de protéines infiniment pures, jusqu’à 50 mg/ml
• Traitement rapide, facile et reproductible sur n’importe quel système de chromatographie liquide (LC)

La Ni-NTA Superflow, la résine de référence utilisée pour la purification des protéines marquées à l’histidine (His), est proposée en cartouches préremplies de 1 ml et 5 ml pour la purification automatisée sur des systèmes de chromatographie liquide de type FPLC, ÄkTA et BioLogic, ou pour la purification manuelle à l’aide d’une seringue.

Comparée aux autres résines, la Ni-NTA offre des performances supérieures pour des rendements plus importants de protéines hautement purifiées (voir l’illustration  La Ni-NTA surpasse les autres résines en termes de rendements de protéines infiniment pures). Une étude comparative indépendante avec d’autres résines au nickel du commerce a révélé que la Ni-NTA Superflow présentait un taux inférieur de lixiviation des ions nickel (voir l’illustration  Une étude indépendante montre que la Ni-NTA perd moins de nickel que toutes les autres résines testées). Cela a son importance, car si la résine libère du nickel, les ligands chargés restants agissent comme un échangeur d’ions et lient les protéines non marquées qui contamineront les fractions d’élution. La stabilité supérieure de la résine Ni-NTA implique que même en présence de 10 mM de DTT, elle peut être utilisée pour obtenir des protéines infiniment pures parfaitement actives (voir l’illustration  Le site de coordination supplémentaire de la Ni-NTA lie les ions nickel plus étroitement que l’IDA).

Comme l’indique le tableau ci-dessous, les puretés sont toujours élevées, quelle que soit l’échelle de purification. Les cartouches Ni-NTA Superflow font partie des solutions complètes et complémentaires proposées par QIAGEN pour les protéines marquées à l’histidine (His) (voir l’illustration  Purification variable du nanogramme au gramme de protéine marquée à l’histidine (His)).

Les matrices Ni-NTA sont la meilleure solution de chromatographie d’affinité pour la purification des protéines marquées à l’histidine (His) (voir l’illustration  Purification performante en une étape des protéines marquées à l’histidine (His)). Leur grande stabilité les rend compatibles avec de nombreux composants de tampons, notamment des dénaturants et détergents puissants et même des agents réducteurs (voir le tableau Réactifs compatibles avec l’interaction His/Ni-NTA). Cette flexibilité permet aux chercheurs de développer des procédés de purification optimaux tout en bénéficiant des excellentes caractéristiques de séparation de la Ni-NTA. Et bien souvent, il n’est pas nécessaire d’effectuer une deuxième étape de chromatographie.

Les matrices Ni-NTA peuvent être utilisées pour augmenter la purification des protéines marquées à l’histidine (His) pour des études des structures (p. ex. avec la cristallographie ou la RMN), ou pour produire des quantités en gramme à des fins de production biopharmaceutique.