PCR et amplification d’ADN

La Taq polymérase standard affiche une activité optimale à 72 °C, mais l’enzyme devient active à environ 37 °C. L’activité à basse température est conséquente, et elle présente l’inconvénient de permettre une amplification non spécifique et des amorçages incorrects pendant la phase initiale à basse température d’une réaction de PCR. Si vous avez besoin d’une PCR automatisée, envisagez plutôt une Taq polymérase hot start.

Contrairement à la Taq standard, les polymérases hot start ne sont pas réactives à température ambiante. Les techniques de PCR hot start suivent les mêmes principes que la PCR classique, à ceci près que l’activité enzymatique est supprimée tant que la première dénaturation n’est pas terminée. Cela limite la liaison non spécifique et l’amorçage incorrect, la spécificité s’en trouve améliorée. En outre, avec cette technologie, il est possible de préparer la réaction à température ambiante, ce qui permet l’automatisation de la PCR. Dans certains cas, même la sensibilité est améliorée, car l’amplification non spécifique diminue le nombre de composants requis pour la réaction par rapport à une amplification cible spécifique.

Toutes les Taqs polymérases sont adaptées pour :