miRNA定量

あらゆるmiRNAを詳しく正確に把握する

定量PCR（qPCR）は、既知のmiRNAターゲットの解析に選ぶべきツールで、次世代シークエンシング（NGS）と比較していくつかの利点があります。qPCRは、迅速で容易かつ安価な手法で、少ないRNA投入量で極めて高感度な解析ができます。スクリーニングやプロファイリングから、NGS研究のバリデーション、機能研究の結果検証に至るまで、容易に規模を拡大できます。

しかし、miRNA qPCRには特殊な課題があります。低い含有率、短い配列、GC含量の大きなばらつき、高い配列相同性のために、非常に特異性の高いプライマーおよびプローブを設計することが困難です。miRCURY LNA miRNA PCRおよびProbe PCRシステムはこれらの課題を解決することを目的として設計されています。最も要求の厳しいアプリケーションでも堅牢で高感度なmiRNAプロファイルを得ることができます。

LNA強化miRNA qPCR

どのように利点を得られるか

柔軟性の高いオプション

SYBR Green検出法またはプローブ検出法、個々のアッセイまたはパネル、1ステップまたは2ステップRT-qPCRを選択

高感度検出

プレ増幅は不要で最低1コピーからmiRNAを定量

確実に効果を発揮

あらゆるmiRNA解析を確実に成功させるプレデザインアッセイと使いやすいオンラインのカスタム設計ツール

迅速に結果を得られる

迅速で簡略なワークフロー–プレ増幅は不要で、RNAからデータまでわずか2～3時間

あらゆるmiRNAを解析

AU含量にかかわらず、密接に関連するmiRNAを正確に検出および識別

LNAによる強化

最適化された設計により非特異的増幅とプライマーダイマー形成を防ぎ、より優れた感度と特異性を実現

miRNAバイオマーカーを容易に解析

がん、心臓病、神経系機能、うっ血、DNA修復といった疾患や生物学的プロセスにおいて、miRNAは有力なバイオマーカーとなる高い可能性があります。

弊社が提供するプレデザインmiRNA PCRアッセイは最も包括的な市販アッセイの1つです。目的のターゲットに適した必要なアッセイを容易に見つけることができます。各ポートフォリオには271の種に対応した31,000を超える独自のアッセイが含まれ、miRBase 22のターゲットを完全に網羅しています。

新規のmiRNAや低分子RNAを研究していますか？プレデザインアッセイがない場合は、便利なオンラインビルダーでカスタムアッセイをご注文いただけます。

GENEGLOBEで詳細を見る

Study the relevant targets for relevant results

適切なターゲットを研究して適切な結果を得る

複数の種に対応したプレデザインフォーカスパネルは、生物学的に関連性のあるmiRNAをスクリーニングする迅速かつ簡便な方法です。各パネルのターゲットは、文献検索、次世代シークエンシング、その他の研究、一流の専門家の助言をもとに慎重に選定されたものです。

血清／血漿フォーカスパネルは、血液、血清、および血漿サンプル中の広範なmiRNA発現解析と、限られた数の入手可能な発表済みの査読付き論文に基づいて綿密に開発されています。健常者および疾患患者から採取した血清および血漿サンプルの100万を超える社内データポイントおよび共同研究データポイントを用いて、各種がん、神経障害、神経変性疾患、アレルギー、炎症の各段からmiRNA発現データなど関連性のあるmiRNAを選定しました。

すべてのパネルはGeneGlobeからオンラインで簡単に注文できます。

フォーカスパネルを見る

あらゆるmiRNAターゲットに最適に設計されたアッセイ

短い配列と高い相同性によってmiRNAアッセイの設計は複雑です。弊社はロック核酸（LNA）を用いてアッセイを最適化することでこの難題を解消します。

LNA塩基によってプライマーの結合親和性が高まることで、非常に短いプライマーとプローブの設計が可能になります。 miRNAターゲット上に直接プライマーとプローブが配置され、miRNA特異的な2ヶ所のアニーリング点をオーバーラップしないように設計できます。これは一般的なオリゴヌクレオチドでは不可能です。結果として、1塩基のヌクレオチドの差異でさえも識別できる特異性を持つ、目的のmiRNAを正確に検出する最適なアッセイを設計できます。

加えて、LNAは、すべてのプライマーが均一に増幅する最適なTm値を持つようにプライマーのTm値を正規化することができます。これによって、GC含量が異なる高含有量および低含有量のターゲットを同時に検出できます。

LNAの詳細を読む

Quantify low-abundance miRNAs without preamplification

低含有量のmiRNAをプレ増幅なく定量

含有量の少ないmiRNAのqPCRによる定量では一般にプレ増幅が必要です。しかし、miRCURY LNA miRNA PCRシステムなら、追加でプレ増幅を行うことなく正確な結果を得られます。

鍵となるのはLNAによる強化です。LNAオリゴヌクレオチドの結合親和性が向上することで、生物学的に関連性があるmiRNAを、プレ増幅不要で、最高水準の特異性と感度で検出できるアッセイを設計することが可能になります。

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ワークフローおよび製品

検出ケミストリーの選択

miRNAの検出にはSYBR-Green法または加水分解プローブ法をお選びいただけます。いずれも高感度および高特異性の検出が可能です。

miRCURY LNA miRNA PCR (SYBR Green)

SYBR Green法は、オーバーラップしない2本のmiRNA特異的なプライマーを使用する簡便で経済的な検出法です。QCのために融解曲線解析が可能です。幅広いポートフォリオのプレデザインパネルをご利用いただけます。

miRCURY LNA miRNA Probe PCR

オーバーラップしないmiRNA特異的なプライマーおよびプローブを使用する唯一のプローブ式miRNA検出法です。非常に堅牢なRT-PCRケミストリーが室温で最長100時間まで反応性の安定に維持するため、自動セットアップが可能です。

どちらの検出ケミストリーが適していますか？

それぞれの方法にコスト、使いやすさ、特異性、堅牢性、設計の自由度、マルチプレックス性能の点で独自の利点があります。

詳細を見る

迅速で簡単なワークフロー

miRCURY LNA miRNA PCRシステムは、汎用性のある逆転写（RT）反応のスピードおよび簡便性と、LNA強化qPCRプライマーの感度および特異性を兼ね備えています。シンプルなワークフローは、組織、細胞、エクソソーム、リキッドバイオプシーなどすべてのサンプルタイプで正確な結果を迅速に提供します。

使用開始前に必要なもの

SYBR Green検出法およびプローブ検出法のケミストリーを含む汎用逆転写キット(1)。各システム専用のPCRマスターミックス(3)と、プレデザインまたは自身で設計したアッセイまたはパネル(4)の組み合わせ。オプションのRNA Spike-In Kit (2)により、RNA単離、cDNA合成、およびPCR増幅の品質確認ができるため、低品質のサンプルを早い段階で識別して調査対象から除外し、時間と試薬を節減します。

	検出システム	SYBR Green	LNA強化加水分解プローブ
1	逆転写	miRCURY LNA RT Kit	miRCURY LNA RT Kit
2	スパイクイン、オプション	RNA Spike-In Kit、RT用	RNA Spike-In Kit、RT用
3	qPCR用マスターミックス	miRCURY LNA SYBR Green PCR Kits	miRCURY LNA Probe PCR Kits
4	アッセイまたはパネル	• miRCURY LNA miRNA PCR Assays • miRCURY LNA miRNA Custom PCR Assays • miRCURY LNA miRNA Focus PCR Panels • miRCURY LNA miRNA Custom PCR Panels • miRCURY LNA miRNA miRNome PCR Panels	• miRCURY LNA miRNA Probe PCR Assays • miRCURY LNA miRNA Custom Probe PCR Assays 近日発売： • miRCURY LNA miRNA Focus Probe PCR Panels • miRCURY LNA miRNA Custom Probe PCR Panels • miRCURY LNA miRNA miRNome Probe PCR Panels

どのアッセイまたはパネルが研究に最適ですか？

miRCURY LNA miRNA PCRシステムは、個々のアッセイまたは完全に自由なカスタムパネルを用いて各種研究に合わせて実験をセットアップします。同じcDNA反応液を使用することで、個々のプライマー、プレデザインmiRNomeパネルおよびフォーカスパネル、またはカスタムパネル間をシームレスに移行できます。