말단에 내부 마커 또는 라벨 추가
효소 DNA 라벨링에는 분자 말단 또는 분자 내부에 라벨링하는 두 가지 방법이 있습니다. 형광단 또는 변형 뉴클레오티드와 같은 검출 가능한 마커는 효소 작용을 통해 5’ 및 3’기를 추가하여 도입할 수 있을 뿐만 아니라 적절한 효소를 직접 결합하거나 사후 라벨링 기술을 통해 내부 마커를 도입할 수도 있습니다.
핵산에 라벨을 추가하기 위한 효소 전략
효소 작용에 의한 라벨링은 체외 및 세포 내 핵산의 기능과 역학을 규명하려는 많은 연구에 필요합니다. 라벨링된 뉴클레오티드가 DNA 또는 RNA에 추가될 수 있는 모든 부위에는 추가를 촉매할 수 있는 적절한 효소가 있습니다.
제품명 | DNA Polymerase I | Klenow Fragment | Klenow (3'-5'exo-) Fragment |
Mako DNA Polymerase |
T4 DNA Polymerase |
T7 DNA Polymerase |
---|---|---|---|---|---|---|
설명 | 친온성 DNA 중합효소 |
E. coli DNA 중합효소 I 의 잘린 생성물 |
E. coli DNA 중합효소 I 의 유도체 |
엑소뉴클레아제 결핍 중합효소 |
5'➞3' 방향의 프라이밍된 DNA 템플릿의 연장 |
고도 연작용 DNA 중합효소 |
특성 | • 5'➞3' DNA 합성 |
• 5'➞3' 중합효소 |
• 5'➞3' 중합효소 |
• 가닥 변위 활성 없음 |
• 5' 및 3' 말단 연마 • 가닥 변위 없음 |
• 이례적으로 고도의 합성 및 복제 정확도 비율 |
용도 | 틈 번역(nick translation)에 의한 DNA 라벨링, cDNA 합성 |
필인 5’ 오버행(fill-in 5’ overhang)에 의한 DNA 블런팅(blunting), 2차 가닥 cDNA 합성, 염기서열 분석 및 부위 특이적 돌연변이 |
NextGen 염기서열 분석을 위한 A 테일링(A-tailing), 가닥 변위 증폭, DNA 라벨링 |
염기서열 분석 | 이중 가닥 DNA 라벨링 |
높은 연작용, 부위 특이적 돌연변이, 이차 가닥 cDNA 합성 |
엑소뉴클레아제 활성 |
3'➞5' 및 5'➞3' 둘 다의 엑소뉴클레아제 활성 |
3'➞5' 엑소뉴클레아제 활성, 하지만 5'➞3' 엑소뉴클레아제 활성은 없음 |
프루프리딩 (3'➞5') 및 틈 번역(nick-translation) (5'➞3') 핵산분해효소 활성 결핍 |
3'➞5' 및 5'➞3' 둘 다의 엑소뉴클레아제 활성 없음 |
강력한 3'➞5' 엑소뉴클레아제 활성, 하지만 5'➞3' 엑소뉴클레아제 활성은 없음 |
3'➞5' 엑소뉴클레아제 활성 |
동결건조 적합, 글리세롤 비함유 |
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