Genetic editing and gene research - image
Pharma und Biotech

Gentherapie

 

Die Gentherapie hat das Potenzial, durch den Transfer von genetischem Material in die richtigen Körperzellen die Behandlung monogener Erkrankungen grundlegend zu verändern und möglicherweise sogar zur Heilung zu führen. Gentherapie kann mit Plasmiden durchgeführt werden, aber zumeist kommt ein virusvermittelter Gentransfer mit dem Adeno-assoziierten Virus (AAV) oder Lentivirus zum Einsatz.

AAV-Vektoren werden oftmals aufgrund ihrer kleineren Verpackungsgröße (~5 kb) bevorzugt, aufgrund derer sie sich für die Einbringung kleiner Gene besonders eignen. Da sie nicht integrierend sind, weisen sie zudem eine relativ geringe Systemtoxizität auf. Außerdem können sie sich nicht ohne Helfervirus vermehren, was sie sicher für den klinischen Einsatz macht.

Testen Sie ein digitales PCR-Gerät
Möchten Sie mehr über digitale PCR-Lösungen erfahren, um Ihre Anforderungen an Zell- und Gentherapie zu erfüllen? Füllen Sie das Formular aus, um eine Demo unserer digitalen PCR-Geräte anzufordern.

AAV-Virustiter-Quantifizierung

Die genaue Quantifizierung und Charakterisierung von AAV sind für die präzise Patientendosierung entscheidend. Die qPCR ist eine weit verbreitete Methode zur AAV-Titer-Quantifizierung. Diese Technik wird allerdings durch das Vorliegen von PCR-Inhibitoren limitiert, da diese die Amplifikation behindern und zu Variabilität führen können. Darüber hinaus erfordert sie eine Standardkurve.

Die digitale PCR hingegen zeigt aufgrund der Partitionierung und Endpunktmessung eine verglichen mit der qPCR verbesserte Amplifikationseffizienz und höhere Toleranz gegenüber Inhibitoren, ohne eine Standardkurve zu erfordern.

Wir haben einen neuen Workflow zur Virusvektorgenom-Quantifizierung von der Capsidlyse bis hin zur Titerbestimmung entwickelt, der für Singleplex- und Multiplex-Assays zur Quantifizierung und Qualifizierung von AAVs mit dem QIAcuity Digital PCR System verwendet werden kann.

Petri dish, dPCR cell gene therapy
Image of three corporate people talking
Greifen Sie auf benutzerdefinierte Design-Services für digitale PCR-Assays zu

Wir haben uns mit Niba Labs zusammengetan, um neue benutzerdefinierte Simplex- oder Multiplex-Assays zur Quantifizierung von Nukleinsäuren und zur Optimierung bestehender qPCR-Assays für die Verwendung mit digitaler PCR zu entwickeln. Niba Labs wird die Leistung der Assays bewerten und sie unter Anwendung guter Herstellungspraxis (GMP) validieren.

Mit unseren kombinierten Produkten und Services können QIAGEN und Niba Labs Ihnen helfen, eventuelle Ressourcenbeschränkungen zu umgehen und anspruchsvolle Projekt-Zeitpläne einzuhalten.

Der moderne Ansatz
Mit einer schnelleren, skalierbaren, plattenbasierten dPCR-Methode kann die Gentherapieherstellung beschleunigt werden.
Digitale PCR für die AAV-Titration
Digitale PCR für die AAV-Titration
Wie können Sie die Präzision und Variabilität Ihrer AAV-Titermessung verbessern? Entdecken Sie die dPCR zur AA-Titration mit Stuart Nelson von Eli Lilly.
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Absolut, genau, verifiziert
Absolut, genau, verifiziert
Vereinfachte AAV-Quantifizierung zur Unterstützung der nächsten Generation von Gentherapien – ein vollständiger Workflow mit dem CGT Viral Vector Lysis Kit.
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AAV-Titration in nur 2 Stunden
AAV-Titration in nur 2 Stunden
Finden Sie heraus, warum das Center for Breakthrough Medicine das QIAcuity Digital PCR System als Methode der Wahl für die AAV-Titration empfiehlt.
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Standardisierter Workflow zur Virusvektorgenom-Quantifizierung
Standardisierter Workflow zur Virusvektorgenom-Quantifizierung

Workflows auf Basis quantitativer PCR sind praktisch, führen aber zu großen Variabilitäten. Finden Sie heraus, wie spezialisierte Capsidlyse-Kits und digitale PCR-Assays eine genaue, reproduzierbare und schnelle Vektorgenom-Titration ermöglichen.

Erfahren Sie, was es Neues gibt
Hochdurchsatz-Virustitration von AAV
Hochdurchsatz-Virustitration von AAV
Sehen Sie sich an, wie das Center for Breakthrough Medicines die QIAcuity dPCR einsetzt, um aus Multiplex-Assays mit anspruchsvollen Proben genaue Titer zu erhalten.
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Eine dPCR-Methode für rAAV-Genomtiter
Eine dPCR-Methode für rAAV-Genomtiter
Schauen Sie sich an, wie Dr. A’Drian Pineda und Dr. Huiwen Liu, leitende Wissenschaftlerin bei Resilience, die prozessbegleitende rAAV-Vektorgenom-Quantifizierung mit dem QIAcuity System für die digitale PCR diskutieren.
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Optimiertes prozessbegleitendes rAAV-Vektorgenomtiter-Protokoll
Optimiertes prozessbegleitendes rAAV-Vektorgenomtiter-Protokoll
Diese Studie zeigt, wie das plattenbasierte QIAcuity dPCR-System die gleiche Genauigkeit und Präzision bietet wie das ddPCR-System, jedoch mit kürzerer Zeit von der Probe zum Ergebnis und höherem Gesamtdurchsatz und besserer Skalierbarkeit.
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Reproduzierbare AAV-Quantifizierung
Reproduzierbare AAV-Quantifizierung
Hier testen wir die Reproduzierbarkeit der Quantifizierung und Qualifizierung von AAV-Proben unter Anwendung eines genauen und skalierbaren Duplex-Assays auf dem QIAcuity dPCR-Gerät, der sowohl auf ein Insert als auch das virale Rückgrat abzielt.
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Interessieren Sie sich für ein personalisiertes Paket, das den Anforderungen Ihres Unternehmens gerecht wird?
Uns ist bewusst, dass es nicht die eine Universallösung gibt. Wir bieten eine Palette an Produkten, Technologien und Services für die Gentherapieforschung an. Kontaktieren Sie uns, damit wir zusammen ein maßgeschneidertes Paket für Sie entwickeln können.
EndoFree Plasmid Kits
dna purification plasmid dna
EndoFree Plasmid Kits
For purification of up to 10 mg endotoxin-free advanced transfection-grade plasmid or cosmid DNA
QIAcuity Residual DNA Quantification Kits
dpcr assays kits and instruments dpcr kits
QIAcuity Residual DNA Quantification Kits
For checking carryover of host cell DNA with higher accuracy and precision using the QIAcuity Digital PCR System

Die Verschleppung von restlicher Wirtszell-DNA (Host-Cell DNA, HCD) stellt bei der Herstellung von Protein- und Impfstoff-Therapeutika ein wesentliches Sicherheitsrisiko dar. Zu den Risiken zählen durch Ihr Zell- oder Gentherapieprodukt verursachte Onkogenität, Infektiosität und Immunogenität. Aus diesem Grund dürfen die HCD-Konzentrationen nicht die durch Regulierungsbehörden wie die US Food and Drug Administration und die Weltgesundheitsorganisation festgelegten Werte überschreiten.

Verglichen mit der qPCR bietet die digitale PCR eine höhere Nachweissensitivität bei geringeren eingesetzten Templatemengen, wodurch robustere Applikationen möglich werden. Ein Multicopy-Target-Assay gewährleistet, dass die Ergebnisse nicht durch den Fragmentierungsgrad der Rest-DNA (resDNA), ein Problem bei der qPCR, beeinflusst werden.

Darüber hinaus kann kontaminierende DNA in Ihren PCR-Reagenzien eine signifikante Quelle von Hintergrund und falsch positiven Ergebnissen sein. Ultra Clean Production erhöht die Spezifität und Effizienz der sondenbasierten digitalen PCR für eine genaue Singleplex- oder bis zu 5-plex-Analyse. Dedizierte Prozesse werden implementiert, um die Ultra Clean Production des Master-Mix zu ermöglichen und so den Hintergrund an kontaminierender DNA und GC-bedingte systematische Messabweichungen zu minimieren, damit Sie Ihren PCR-Reagenzien voll und ganz vertrauen können. Durch diese Eigenschaften eignet sich der Master-Mix ideal für kontaminationsfreie mikrobielle Applikationen sowie Qualitätskontroll-Applikationen wie das Testen auf Rest-DNA.

QIAcuity Residual DNA Quantification Kits
dpcr assays kits and instruments dpcr kits
QIAcuity Residual DNA Quantification Kits
For checking carryover of host cell DNA with higher accuracy and precision using the QIAcuity Digital PCR System
QIAcuity UCP Probe PCR Kit
dpcr assays kits and instruments dpcr kits
QIAcuity UCP Probe PCR Kit
Kits from Ultra Clean Production for use with the QIAcuity digital PCR instruments
QDI, PKB, QDI Data Scientist, Caucasian female sitting in front of computer with two screens holding papers, in an office setting
Bringen Sie Ihre datenbasierten Gentherapien voran

Von der Datenanalyse zu Datenbanken, von der Genexpression zur Genomassemblierung, von der Interpretation zur Integration – QIAGEN Digital Insights bietet die Bandbreite und Qualität an Bioinformatik-Tools, die Sie benötigen, um aussagekräftige Erkenntnisse zu gewinnen und die Entdeckung von Gentherapien voranzubringen.