Quantification des miARN

Examinez les miARN de façon exacte et approfondie

La PCR quantitative est l’outil de choix pour l’analyse des cibles de miARN connues, et elle offre plusieurs avantages par rapport au séquençage à haut débit. La qPCR est rapide, simple et peu coûteuse et fournit des analyses extrêmement sensibles à partir de faibles quantités d’ARN en entrée. Elle évolue également facilement entre la sélection, le profilage, la validation des études de séquençage à haut débit et la vérification des résultats des études fonctionnelles.

Mais la qPCR des miARN présente des défis particuliers. Leur faible abondance, la courte taille de leurs séquences, leur grande variabilité de contenu GC et leurs familles hautement homologues rendent difficile la conception d’amorces et de sondes très spécifiques. Nous avons conçu les systèmes miRCURY LNA miRNA PCR et Probe PCR pour surmonter ces problèmes, afin que vous puissiez compter sur des profils miRNA robustes et hautement sensibles, même pour vos applications les plus difficiles.

qPCR des miARN améliorée par LNA

Comment vous pouvez en profiter

Options flexibles

Choix de détection par SYBR Green ou par sonde, dosages individuels ou panels, RT-qPCR en une ou deux étapes

Détection à haute sensibilité

Quantifiez les miARN à partir de seulement 1 copie sans nécessiter de préamplification

Réussite garantie

Dosages préconçus pour tous les miARN et outils de conception personnalisée en ligne garantissant la réussite de l’analyse de n’importe quel miARN

Obtention rapide des résultats

Méthode simple et rapide – de l’ARN aux données en 2 à 3 heures, sans nécessiter de préamplification

Analysez n’importe quel miARN

Détectez avec exactitude et différenciez entre les miARN étroitement liés, indépendamment du contenu en AU

Performances augmentées par des LNA

L’optimisation de la conception empêche l’amplification non spécifique et la formation de dimères d’amorces pour une plus grande sensibilité et spécificité.

Analysez n’importe quel biomarqueur miARN avec facilité

Les miARN montrent un potentiel élevé en tant que biomarqueurs pour les maladies et les processus biologiques tels que le cancer, les maladies cardiovasculaires, le fonctionnement du système nerveux, l’hémostase, la réparation de l’ADN et d’autres encore.

Notre offre de dosages PCR des miARN préconçus est la plus complète du marché, vous permettant ainsi de trouver facilement les dosages dont vous avez besoin pour vos cibles d’intérêt. Chacune de nos gammes comprend plus de 31 000 dosages uniques pour 271 espèces différentes et fournit une couverture complète des cibles dans miRMase 22.

Vous étudiez un nouveau miARN ou un petit ARN ? Utilisez notre outil de création en ligne pratique pour commander des dosages personnalisés si aucun dosage prédéfini n’est disponible.

Plus d'informations dans GeneGlobe

Study the relevant targets for relevant results

Étudiez des cibles pertinentes pour obtenir des résultats pertinents

Nos panels dédiés préconçus couvrent plusieurs espèces et fournissent un moyen rapide et pratique de sélectionner les miARN biologiquement pertinents. Les cibles de chaque panel ont été soigneusement choisies à partir d’un mélange de recherches dans la littérature, de séquençage à haut débit et d’autres études et conseils d’experts de premier plan.

Les panels dédiés sérum/plasma ont été méticuleusement développés sur la base de nos analyses approfondies de l’expression des miARN dans des échantillons de sang, de sérum et de plasma, ainsi que sur le nombre limité d’articles publiés disponibles évalués par des pairs. Plus de 1 million de points de données internes et collaboratifs provenant d’échantillons de sérum/plasma prélevés sur des individus sains et malades ont été utilisés pour sélectionner les miARN pertinents, y compris les données d’expression des miARN provenant de différents stades de cancers, troubles neurologiques, maladies neurodégénératives, allergies, inflammations, etc.

Tous les panels peuvent être facilement commandés en ligne par l’intermédiaire de GeneGlobe.

Explorer les panels dédiés

Des dosages conçus de manière optimale pour n’importe quelle cible miRNA

Les courtes longueurs des séquences et les similitudes élevées compliquent la conception des dosages des miARN. Nous surmontons cette difficulté en optimisant nos dosages avec des acides nucléiques verrouillés (LNA, pour Locked Nucleic Acids).

Les bases LNA augmentent l’affinité de liaison des amorces, ce qui nous permet de concevoir des amorces et des sondes très courtes, qui peuvent être placées directement sur la cible miARN pour créer deux points de renaturation spécifiques aux miARN qui ne se chevauchent pas. Il serait impossible d’obtenir le même résultat avec des oligos standards. Le résultat : une conception de dosage optimale qui détecte avec précision votre miARN d’intérêt, avec une spécificité qui peut même distinguer des différences au niveau d’un seul nucléotide.

De plus, les LNA permettent de normaliser l’amorce Tm afin que toutes les amorces aient la Tm optimale pour une amplification uniforme. Cela vous permet de détecter simultanément des cibles à forte et faible abondance avec un contenu GC hétérogène.

Plus d'informations au sujet de LNA

Quantify low-abundance miRNAs without preamplification

Quantifier les miARN de faible abondance sans préamplification

La quantification des miARN en faible abondance par qPCR nécessite généralement une préamplification, mais les systèmes miRCURY LNA miRNA PCR fournissent des résultats exacts sans cette étape supplémentaire.

Quel est le secret ? Il s’agit de l’amélioration par les LNA. L’affinité de liaison accrue des oligos LNA nous permet de concevoir des dosages capables de détecter tout miARN biologiquement pertinent avec la plus grande spécificité et la plus grande sensibilité – sans avoir besoin de préamplification.

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Flux de travail et produits

Vous avez le choix du procédé chimique de détection

Nous vous offrons le choix entre la détection des miARN par SYBR-Green ou par sonde d’hydrolyse, toutes deux offrant une détection hautement sensible et spécifique.

miRCURY LNA miRNA PCR (SYBR Green)

Détection par SYBR Green pratique et économique à l’aide de deux amorces non chevauchantes spécifiques aux miARN. L’analyse de la courbe de fusion est possible pour les études de CQ, et une gamme plus large de panels préconçus est disponible.

miRCURY LNA miRNA Probe PCR

Le seul système de détection de miARN basé sur une sonde offrant des amorces et des sondes spécifiques aux miARN, sans chevauchement. Le kit de RT-PCR extrêmement robuste permet une configuration automatisée en maintenant les réactions stables pendant 100 heures à température ambiante.

Quel kit de détection vous convient ?

Chaque méthode offre des avantages uniques en termes de coût, de facilité d’utilisation, de spécificité, de robustesse, de flexibilité de conception et de capacité de multiplexage.

Plus d'informations

Méthode simple et rapide

Les systèmes miRCURY LNA miRNA PCR combinent la rapidité et la commodité d’une réaction de transcription inverse (RT) universelle avec la sensibilité et la spécificité des amorces de qPCR aux performances augmentées par des LNA. Le flux de travail simplifié assure des résultats rapides et précis pour tous les types d’échantillons, y compris les tissus, les cellules, les exosomes et les biopsies liquides.

Ce qu’il vous faut pour commencer

Un kit universel de transcription inverse (1) contient les réactifs chimiques pour la détection par SYBR Green et la détection par sonde. Les master mix de PCR dédiés (3) pour chaque système sont combinés avec les dosages ou panels pré-conçus ou auto-conçus (4) de votre choix. Le kit RNA Spike-In Kit en option (2) vous permet d’effectuer le contrôle qualité des étapes d’isolement de l’ARN, de synthèse de l’ADNc et d’amplification PCR, afin que vous puissiez identifier rapidement les échantillons de mauvaise qualité, les éliminer de votre étude et gagner du temps tout en économisant des réactifs.

	Système de détection	SYBR Green	Sonde d’hydrolyse améliorée par LNA
1	Transcription inverse	miRCURY LNA RT Kit	miRCURY LNA RT Kit
2	Spike-In en option	RNA Spike-In Kit, For RT	RNA Spike-In Kit, For RT
3	Master mix pour qPCR	miRCURY LNA SYBR Green PCR Kits	miRCURY LNA Probe PCR Kits
4	Dosage ou panel	• miRCURY LNA miRNA PCR Assays • miRCURY LNA miRNA Custom PCR Assays • miRCURY LNA miRNA Focus PCR Panels • miRCURY LNA miRNA Custom PCR Panels • miRCURY LNA miRNA miRNome PCR Panels	• miRCURY LNA miRNA Probe PCR Assays • miRCURY LNA miRNA Custom Probe PCR Assays Prochainement : • miRCURY LNA miRNA Focus Probe PCR Panels • miRCURY LNA miRNA Custom Probe PCR Panels • miRCURY LNA miRNA miRNome Probe PCR Panels

Quel dosage ou panel est le mieux adapté à votre étude ?

Les systèmes miRCURY LNA miRNA PCR vous permettent d’adapter la configuration expérimentale à différents types d’études avec des dosages individuels ou des panels personnalisés entièrement flexibles. Vous pouvez utiliser la même réaction d’ADNc et passer facilement entre différentes amorces individuelles, différents panels miRNome et Focus préconçus ou différents panneaux personnalisés.